深低温冻存对脐血单个核细胞免疫特性影响的研究

深低温冻存对脐血单个核细胞免疫特性影响的研究

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目的 研究冻存过程对脐血造血细胞免疫表型和细胞因子分泌量的影响,为脐血的临床移植提供实验依据。方法 18例脐血标本经比重为1.077的Ficoll-Hyoaque分离液分出单个核细胞(MNC)后,分成三组,即新鲜标本对照组、DMSO对照组及低温冻存组。低温冻存组加二甲亚砜(终浓度为10%),经程控降温后放-196℃液氮保存,冻存30天后在40℃的水浴中快速复苏。复苏后其它两组一样进行细胞计数、台盼蓝拒染率检测:通过流式细胞仪用单克隆抗体检测单个核细胞中CD4+、CD8+细胞亚群的比例;并经PHA刺激,培养72小时,用ELISA法检测培养上清液中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、γ-干扰素(IFN-γ,)及粒-巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)的含量。结果 台盼蓝拒染率比新鲜标本对照组有所下降(t=7.55,P<0.01)。细胞亚群CD4+细胞比例明显升高(t=-2.83~-2.73,P<0.05)。IL-2、IL-6及IFN-γ三种细胞因子检测结果,除IL-6与新鲜标本对照组比较差别不具统计学意义外,其它均有所上升(t=-7.91~-2.60,P<0.01或P<0.05)。GM-CSF与DMSO对照组无差别,而与新鲜标本对照组比较检测结果有下降现象(t=7.74,P<0.01)。结论 冻存造成了淋巴细胞亚群及细胞因子分泌量的变化,这一现象表明,冻存提高了脐血造血细胞的免疫功能。在脐血移植后,这可能有利于机体早期免疫机能的重建,提高抗感染、抗肿瘤的能力。

论文目录

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