GRP78表达的下调对肺腺癌细胞耐药的影响

论文摘要

目的:采用RT-PCR、免疫荧光细胞化学等分子生物学技术,检测在Ca2+鏊合剂BAPTA-AM作用下人肺腺癌细胞SPCA1糖调节蛋白78（GRP78）的表达水平,并分析GRP78表达下调对肺腺癌细胞对VP-16耐药的影响。方法:将一定密度、生长状态良好的SPCA1细胞随机分为抑制组（加入BAPTA-AM,浓度为0、10、20、30、40、50μM）、诱导组（加入A23187,浓度为2μM）及对照组（加入PBS）。采用RT-PCR、免疫荧光细胞化学方法检测各组细胞中GRP78在核酸和蛋白水平的表达。再向各组细胞中加入化疗药物VP-16（浓度为30μM）,利用流式细胞仪测定细胞生存率。根据GRP78的表达水平与细胞对VP-16的生存率,分析GRP78在肺腺癌细胞对VP-16耐药中的作用。结果:BAPTA-AM可抑制人肺腺癌细胞SPCA1 GRP78的表达,且GRP78表达水平与BAPTA-AM具有一定的浓度依赖性。抑制组的荧光强度明显弱与诱导组和对照组。A23187在基因和蛋白水平均能诱导GRP78的表达。流式细胞仪检测细胞凋亡率结果显示:抑制组细胞凋亡率高于对照组和诱导组,而诱导组细胞凋亡率最低。结论:本实验研究结果表明:BAPTA-AM能够抑制人肺腺癌细胞SPCA1核酸和蛋白水平GRP78的表达,而A23187能够诱导GRP78表达。GRP78表达程度与VP-16作用下细胞的凋亡率具有相关性,GRP78表达越高,细胞生存率越高。这表明GRP78能够提高SPCA1细胞对VP-16的耐药性,且其耐药性与GRP78表达的程度有关。在基因水平干预GRP78的表达,一方面能够减弱GRP78对肿瘤细胞的保护作用,另一方面能够减低肿瘤细胞对化疗药物的耐药,促进肿瘤细胞的凋亡,提高化疗药物疗效,这一手段可能成为未来治疗肺癌的新办法。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料与方法
• （五） 结果
• （六） 讨论
• （七） 结论
• （八） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢