论文摘要
鹅毛玉凤花[Habenaria dentata(Sw.)Schltr.]系兰科(Orchidease)玉凤花属植物。别名双肾参、双肾子、对对参等,地生草本,为国家二级重点保护野生植物。本研究对野生鹅毛玉凤花(Habenaria dentata)菌根结构和真菌侵染途径进行显微观察;对从野生鹅毛玉凤花根中分离的菌根真菌菌株进行分类鉴定;并进行共生萌发和促生实验的研究。本文就鹅毛玉凤花菌根真菌的分离及鉴定、鹅毛玉凤花菌根真菌在种子萌发及组培苗生长中的应用进行了初步的研究。结果如下:一、采用徒手切片,酸性品红和棉蓝染色,对鹅毛玉凤花菌根的基本结构和真菌侵染鹅毛玉凤花根的途径进行显微镜检观察到鹅毛玉凤花具有典型的兰科植物菌根构造,菌根真菌从根毛进入根被和外皮层,经通道细胞侵入到皮层薄壁组织,在皮层薄壁细胞内形成菌丝团。二、用单菌丝团分离法通过两次分离,共得到186个菌株,根据菌落和菌丝特征、产孢结构、孢子形态、细胞核多少、子实体诱导等试验观察结果结合分子生物学方法,初步鉴定所获菌株主要为半知菌类的有丝孢菌,优势种属为兰科丝核菌属,占66.3%,包括角菌根菌属(Ceratobasidium)、瘤菌根菌属(Epulorhiza)、念珠菌根菌属(Moniliopsis)、丝核菌属(Rhizoctonia);其它菌株分别隶属于:镰刀菌属(Fusarium)、木霉属(Trichoderma)、地霉属(Geotriehum)、茎点菌属(Phoma Sacc.)等。三、分别在秋季和春季分离鹅毛玉凤花的菌根菌,所获的菌根真菌的数量和种类因季节不同而不同,秋季分离到103株菌株的优势菌群是不产孢的兰科丝核菌类的角菌根菌属、瘤菌根菌属,产孢的是镰刀菌属、木霉属、茎点霉属等;春季分离到83株菌株其中优势菌群是不产孢的兰科丝核菌类的念珠菌根菌属、角菌根菌属,产孢的是镰孢菌属,明显秋季所分离菌的种类和数量高于春季,证实兰科植物不同生长阶段有不同的菌发挥着作用,具体的作用机制有待进一步作深入研究。四、共生萌发实验的结果表明:在自然条件下,鹅毛玉凤花种子萌发率低,在无菌不添加任何激素的情况下,萌发率为27.5%。在供试的21株菌株中,有18株菌能与鹅毛玉凤花种子和谐共生,种子无病变,其中16株菌使种子萌发率高于对照。其中8株的菌达到显著性(p=0.05);另有5株的菌抑制种子萌发,其中3株菌的抑制作用显著(p=0.05),并且使种子发生病变。五、在供试的21株菌株中,有12株使鲜重增重,有占57.1%的12株菌株能与鹅毛玉凤花幼苗鲜重增加,未幼苗发生病变或黄苗、死苗现象,占42.9%的9株菌株导致幼苗发黄或死苗现象。