论文摘要
第一部分慢性间歇低氧及再氧合对肾脏组织细胞形态和低氧诱导因子-1α表达的影响目的探讨慢性间歇低氧（chronic intermittent hypoxia, CIH）及再氧合对大鼠肾脏组织细胞形态和低氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α）表达的影响。方法采用自制的CIH动物舱,通过中央处理器的控制程序调节舱内氧气、氮气的输出流量、气体的输出时间及输出气体的切换,使得每1次缺氧循环时间为1min,氧气浓度循环于6%-21%之间。将27只大鼠随机分成3组,每组9只,分别为CIH组、复氧组和对照组。将CIH组置于动物舱给予间歇低氧,每天8h,持续35d。复氧组前35 d处理同CIH组,第36 d起舱内输入空气,每天8h,持续21d。对照组动物舱内输入空气,其余条件同CIH组。HE染色观察肾脏组织形态,透射电镜观察肾近曲小管上皮细胞超微结构。免疫组织化学染色检测肾脏HIF-1α蛋白表达,Western blot检测肾脏HIF-1α蛋白含量,real-time PCR检测肾脏HIF-la mRNA表达。结果CIH组肾小球和近曲小管呈高度肿胀,复氧组肾小球和近曲小管水肿较CIH组显著减轻,对照组肾脏组织细胞形态未见明显异常。CIH组近曲小管上皮细胞内呈现不同程度的空泡变性、核膜肿胀和线粒体肿胀,复氧组超微结构改变较CIH组显著减少,对照组近曲小管上皮细胞超微结构未见明显异常。CIH组近曲小管和远曲小管HIF-1α染色较对照组显著增强,复氧组HIF-1α染色较CIH组显著减弱。CIH组、复氧组和对照组肾肾脏HIF-la蛋白的相对含量分别为1.72±0.57、1.08±0.39和1.03±0.35,CIH组和对照组间差异有显著统计学意义（P<0.05）,CIH组和复氧组间差异有显著统计学意义（P<0.05）,复氧组和对照组间差异无统计学意义（P>0.05）。CIH组、复氧组和对照组肾脏HIF-1αmRNA的相对表达量分别为22.24±6.49、7.46±2.79和3.81±1.72,CIH组和对照组间差异有显著统计学意义（P<0.05）,CIH组和复氧组间差异有显著统计学意义（P<0.05）,复氧组和对照组间差异无统计学意义（P>0.05）。结论CIH导致肾脏组织细胞出现显著的水肿变性,肾脏HIF-1α蛋白水平显著升高HIF-1αmRNA表达显著增加；复氧后肾脏组织细胞水肿减轻,HIF-1α蛋白水平显著降低,HIF-1αmRNA表达显著减少。慢性间歇低氧是导致肾脏缺氧和组织细胞损伤的一种因素,间歇低氧后复氧能减轻肾脏缺氧和组织细胞变性,具有一定的治疗作用。第二部分慢性间歇低氧及再氧合对肾脏中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白表达的影响目的探讨慢性间歇低氧（chronic intermittent hypoxia, CIH）及再氧合对大鼠肾脏中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL）表达的影响。方法采用自制的CIH动物舱,通过中央处理器的控制程序调节舱内氧气、氮气的输出流量、气体的输出时间及输出气体的切换,使得每1次缺氧循环时间为1min,氧气浓度循环于6%～21%之间。将27只大鼠随机分成3组,每组9只,分别为CIH组、复氧组和对照组。将CIH组置于动物舱给予间歇低氧,每天8h,持续35d。复氧组前35 d处理同CIH组,第36 d起舱内输入空气,每天8h,持续21d。对照组动物舱内输入空气,其余条件同CIH组。免疫组织化学染色检测肾脏NGAL蛋白表达,Western blot检测肾脏NGAL蛋白含量,real-time PCR检测肾脏NGAL mRNA表达。结果CIH组肾小球、近曲小管和远曲小管NGAL染色较对照组显著增强,复氧组NGAL染色较CIH组显著减弱。CIH组、复氧组和对照组肾脏NGAL蛋白的相对含量分别为2.17±0.38、1.75±0.14和1.75±0.44, CIH组和对照组间差异具有显著统计学意义（P<0.05）,CIH组和复氧组间差异有显著统计学意义（P=0.05）,复氧组和对照组间差异无统计学意义（P>0.05）。CIH组、复氧组和对照组肾脏NGAL mRNA的相对表达量分别为32.30±9.43、8.69±2.76和6.16±2.63,CIH组和对照组间差异有显著统计学意义（P<0.05）,CIH组和复氧组间差异有显著统计学意义（P<0.05）,复氧组和对照组间差异无统计学意义（P>0.05）。结论CIH导致肾脏NGAL蛋白水平显著升高,NGAL mRNA表达显著增加,复氧后肾脏NGAL蛋白水平显著降低,NGAL mRNA表达显著减少。慢性间歇低氧是导致肾脏组织细胞损伤的一种因素,间歇低氧后复氧能减轻肾脏组织细胞损伤,具有一定的治疗作用。
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