GFAP在微囊化兔坐骨神经组织细胞移植后大鼠损伤脊髓的表达

论文摘要

目的:将具有免疫隔离效应的海藻酸钠微囊包被异种雪旺细胞,并进行移植用于脊髓损伤的治疗研究,通过免疫组织化学方法观察脊髓损伤后及进行微囊化神经组织细胞移植后星形胶质细胞中胶质纤维酸性蛋白（glia fibrillary acidic protein,GFAP）表达的变化。方法:无菌条件下取家兔双侧坐骨神经制成组织细胞悬液,低速离心后与1.5%海藻酸钠溶液混合并喷入20mmol/L 的氯化钡溶液中制成微囊化坐骨神经组织细胞。130 只成年Sprague-Dawley （SD）大鼠随机分为正常组、单纯损伤组、细胞悬液组和微囊组四组:正常组为10 只;其他三组每组各40 只,大鼠于T10右侧半横断伤后,分别植入明胶海绵、明胶海绵吸附的坐骨神经组织细胞悬液及明胶海绵吸附的微囊化坐骨神经组织细胞,术后3、7、14 及28 天,每组各10 只大鼠,4%多聚甲醛经心-升主动脉灌注后取出损伤部位脊髓标本;正常组大鼠则取相应节段脊髓。冰冻切片后行HE 染色观察组织学变化,行免疫组织化学染色观察GFAP 表达的变化。结果:脊髓损伤后神经元数量减少,部分神经元萎缩变小,细胞边界模糊不清,并有大量的巨噬细胞浸润,灰质中有囊腔变化;术后第14 天时炎性反应减轻,胶质细胞增生、肥大,而在微囊组胶质细胞增生较轻;第28 天时微囊组神经元形态基本恢复正常。脊髓损伤后第3 天GFAP 免疫组化染色即出现阳性,星形胶质细胞增大,高峰在损伤后7 天持续至14 天,微囊组与单纯损伤组、细胞悬液组比较差异显著（P <0.01）;至第28 天时则减少,但仍高于正常组。脊髓损伤后,随时间的推移,GFAP 阳性细胞每平方毫米细胞数、阳性细胞体积密度（Vv）、数密度（Nv）、粒子平均体积（—V ）和表面积密度（Sv）均增加。其中阳性细胞数、Sv、Vv、Nv 和—V 在第7 天时,微囊组与对照组、细胞悬液组比较均有明显降低,差异有显著性（P <0.05）;到第28 天时微囊组的阳性细胞数、Vv、Nv、Sv 和—V 都低于另两组（P <0.01）。结论: 微囊化异种坐骨神经组织细胞移植能抑制损伤脊髓GFAP 的表达,减轻由反应性胶质化所形成的胶质瘢痕。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 致谢
• 参考文献
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• 参考文献
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