野木瓜多糖分离鉴定及其对血小板聚集和血栓形成影响的实验研究

论文摘要

目的:从贵州省遵义市正安县产野木瓜中提取并纯化野木瓜多糖（Stauntonia Chinensis Polysaccharides,SCP）,对其特征进行初步研究,以体内、外模型观察SCP对血小板聚集和释放、血栓形成的影响,为野木瓜的进一步研发利用提供基础资料。方法:1、用水提醇沉法提取纯化SCP:苯酚-硫酸法测定野木瓜中多糖含量:红外光谱分析其结构特征,HPLC测定单糖组成;DEAE-Sepharose fast flow分析糖样的电荷分布;Sepharose CL-6B柱层析测定分子量分布。2、以bom’s比浊法测定SOP对胶原,ADP,花生四烯酸（AA）和凝血酶（Thr）诱导的家兔血小板聚集的影响。3、用荧光分光光度法测定SCP对胶原诱导的血小板中5-HT含量的影响。4、用丙二醛试剂盒测定血小板中丙二醛含量（Maleic Dialdehyde,MDA）。5、测定血小板的HTCT（heparin thrombinclotting time,肝素凝血酶凝固时间）反映血小板4因子（platelet factor 4,PF4）的生物活性。6、给小鼠灌胃SCP1h后,经小鼠尾静脉注射胶原蛋白一。肾上腺素混合诱导剂,诱发小鼠血栓性偏瘫和死亡。观察注射混合诱导剂后5min内小鼠死亡数。结果:1.100g野木瓜粉末通过90℃热水煮提,95%乙醇沉淀得到粗多糖,经重新溶解、Sevag法脱蛋白得到SCP3.40g,得率为3.4%。SCP为米黄色粉末状固体,溶于水,不溶于乙醇、丙酮和乙醚等有机溶剂,其水溶液呈粘稠状,pH弱酸性,Molish反应出现紫色环呈阳性。红外吸收光谱分析结果证明所提取的SCP为含甲酯化糖醛酸的多糖类物质。SCP糖含量为51.6%,其单糖组成主要是半乳糖醛酸,甘露糖,葡萄糖醛酸,比例为46.3:18.5:10.3。同时也检测到少量的葡萄糖,半乳糖和阿拉伯糖。电荷分布测定表明SCP是中性糖和酸性糖的混合物。其分子量是588.869Kd。2.SCP17mg/mL,34mg/mL和67mg/mL对胶原,ADP和凝血酶诱导的家兔体外血小板聚集有抑制作用（P＜0.05）。SCP34mg/mL,67 mg/mL对AA诱导的兔血小板聚集有明显的抑制作用（P＜0.01）,17mg/mLSCP对AA诱导的兔血小板聚集无明显的抑制作用（P＞0.05）。3.SCP20mg/mL,40 mg/mL和80 mg/mL可降低胶原作用后血小板5-HT的含量,SCP17 mg/mL,34 mg/mL和67 mg/mL可降低凝血酶作用后血小板中MDA含量（P＜0.05）并且能使以胶原作为聚集诱导剂的HTCT延长。4.SCP300mg/kg,600mg/kg给小鼠灌胃后,与生理盐水组比较,能降低胶原蛋白-肾上腺素诱导小鼠体内血栓形成所致的小鼠死亡率,提高恢复率,并呈剂量依赖性;SCP 150mg/kg对小鼠恢复率的提高无明显作用（P＞0.05）。结论:SCP可以抑制由胶原、AA、ADP和凝血酶诱导的血小皈聚集,其作用饥制与抑制血小板释放5-HT和PF4有关,也与减少凝血酶引起的MDA生成有关;SCP也可以抑制由混合诱导剂诱导的实验性小鼠体内血栓形成。

论文目录

• 1 野木瓜多糖分离鉴定及其对血小板聚集和血栓形成影响的实验研究
• 1.1 英汉缩略词对照表
• 1.2 中文摘要
• 1.3 英文摘要
• 1.4 前言
• 1.5 材料与方法
• 1.6 结果
• 1.7 讨论
• 1.8 参考文献
• 2 抗血小板药物研究进展（综述）
• 3 致谢