论文摘要
脉络膜新生血管是导致渗出型老年黄斑变性、病理性近视等多种疾病视力严重下降的重要原因。目前已有临床研究显示玻璃体腔内注射VEGF-A全长抗体bevacizumab能促使多种原因导致的CNV及特发性CNV消退,黄斑水肿吸收。然而在临床应用中,大部分患者单次玻璃体腔给予bevacizumab后视力提高无法长时间保持。现有的关于bevacizumab对CNV抑制作用的在体研究由于CNV模型的缺陷,尚无法确切反应bevacizumab对CNV的疗效。因此,我们拟利用激光诱导的BN大鼠CNV模型,通过观察bevacizumab(AvastinTM)对其生成及发育的影响,了解bevacizumab治疗CNV的特点,期望能为更好地应用它治疗人CNV提供初步的实验依据。第一部分半导体激光诱导BN大鼠脉络膜新生血管的研究目的:探讨半导体激光创建棕色挪威(brown Norway,BN)大鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)模型的可行性,为CNV防治研究奠定基础。方法:雄性BN大鼠24只,每只鼠随机取一眼作为实验眼,另一眼为对照眼。用半导体激光(波长561nm)围绕大鼠实验眼视乳头进行光凝,激光功率、光斑直径和曝光时间分别为120Mw、100μm及0.1s,每只眼光凝8点。于光凝后3、7、14、21、28、35及56d行荧光素眼底血管造影(fundus fluoresceinangiography,FFA)和吲哚菁绿血管造影(indocyanine green angiography,ICGA)检查后处死动物,摘除眼球制作标本,进行组织病理学观察。结果:ICGA示CNV于光凝后3d生成,14d时发育完全。FFA检查显示CNV呈圆盘状高荧光,渗漏强度于14至28d保持稳定。光凝后14d,光镜下可见视网膜下CNV形成,其中央厚度14至28d维持稳定。结论:半导体激光可以诱导BN大鼠CNV模型,成模时间短,维持时间长。第二部分Bevacizumab对BN大鼠CNV生成及发育影响的实验研究目的:利用激光诱导的BN大鼠CNV模型,探究玻璃体腔内注射bevacizumab对CNV发育的抑制效果。方法:12只雄性BN大鼠,每只鼠随机取一眼作为实验眼,另一眼为对照眼。先用半导体激光光凝实验眼视网膜,然后随机分为bevacizumab组和对照组。Bevacizumab组(6眼)于光凝即时玻璃体腔内给予2μl AvastinTM,而对照组(6眼)给予2μl平衡液。于光凝后7d、14d和21d行FFA和ICGA观察。光凝后21d取实验眼,标本进行HE染色和VEGF免疫组化染色。结果:光凝后7d,ICGA显示bevacizumab组和对照组均有CNV生成,但此时bevacizumab组的FFA荧光强度评分较对照组低,差异有统计学意义。然而,该组评分随后升高,但至光凝后21d仍较对照组低。光凝后21d,Bevacizumab组的CNV平均中央厚度比对照组低,差异有统计学意义,并且免疫组化显示其VEGF阴性。结论:于BN大鼠CNV形成早期玻璃体腔内注射bevacizumab可从形态及渗漏功能两方面抑制CNV的发育。但并不能完全阻止CNV的形成,其抑制渗漏功能的效果亦无法长时间保持。因此bevacizumab联合其它治疗方法可能可以提高CNV的治疗效率。
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