高强度聚焦超声联合超声造影剂消融兔肝VX2移植瘤周围不同范围组织的疗效研究

论文摘要

目的:通过构建兔肝VX2移植瘤模型,观察高强度聚焦超声联合超声造影剂消融兔肝VX2移植瘤周围不同范围组织后,各实验组动物一般情况、切口局部情况、治疗后靶区组织病理特点、肝内外脏器转移情况、肝功能及肿瘤体积变化情况、动物的平均生存期之间的差异,探讨高强度聚焦超声联合超声造影剂消融兔肝VX2移植瘤周围不同范围组织对疗效的影响,以确定最适切除范围,为临床上高强度聚焦超声联合超声造影剂治疗肝癌时的消融范围提供实验依据。方法:取新西兰大白兔51只构建兔肝VX2移植瘤模型,并随机等分为3组:HIFU联合UCA沿肿瘤边缘消融肿瘤（A组）、消融肿瘤及肿瘤周围2mm内的正常组织（B组）、消融肿瘤及周围4mm内正常组织（C组）。（1）观察动物的一般状况、治疗局部皮肤及切口愈合情况;（2）随机取3只实验兔,分别于治疗后即时、3d、7d各处死一只,观察比较不同时间点肉眼及光镜下靶区组织的病理学差异;（3）各组随机取9只实验兔,B超检查测量治疗前、治疗后7天、10天、14天肿瘤最大径及垂直最大径的最小径值,并于治疗后2周同时处死,观察肝内、双肺及腹腔的转移情况;（4）各组中剩余5只实验兔分别于第1d、3d、5d、7d、14d耳缘静脉采血测建模前、治疗前、治疗后血清ALT组内变化情况及组间的差异;记录各组动物生存时间及2月生存率,比较组间差异。结果:所有实验动物肿瘤种植后第7d行B超检查均发现肿瘤生长,第17d,肿瘤直径约1.4-1.8cm大小,成瘤率100%。HIFU+UCA治疗后24h内,动物精神萎靡,食欲不振,24h后逐渐改善,并于3天后恢复正常。所有动物治疗局部皮肤均出现不同程度的烧伤,轻至中度的烧伤可于1周内恢复正常,2只实验兔因治疗局部出现焦痂坏死伴感染伤口未愈合。病理组织学检查:HIFU+UCA治疗后即刻,靶区肿瘤组织变为灰白色凝固性坏死灶,病理检查未见肿瘤组织残留。治疗后第7d,肉眼及组织切片检查见A组所有动物及B组、C组部分动物肿瘤周围可见鱼肉样肿瘤复发灶。三组均有实验兔于治疗后2周出现肝内、双肺及腹腔的转移。与A组相比较:B组、C组肝、肺及腹腔转移率明显降低,差异具有统计学意义（P<0.05）,并且B、C两组间差异无统计学意义（P>0.05）。各组实验动物血清ALT水平在模型建立后均显著增高,组内差异具有统计学意义（P<0.05）,建模前、建模后组间比较血清ALT水平无统计学差异（P>0.05）。治疗后,三组内ALT水平均显著升高并于5d达到顶峰,于两周内下降至正常或接近正常。组间比较:第3d、5d血清ALT水平三组间差异均有统计学意义（P<0.05）;7d以后,B组、C组间无明显差异,第14d,A组ALT血清水平显著高于B组和C组。HIFU+UCA治疗后两周,A组肿瘤体积较治疗前明显增大,差异具有统计学意义（P<0.01）。B组、C组肿瘤体积较治疗前略有增大,差异无统计学意义（P>0.05）。A组与B组、C组相比,差异具有统计学意义（P<0.05）。A组、B组、C组治疗后肿瘤生长均受到抑制,但B组、C组肿瘤抑制更加明显（P<0.01）,两组无明显差异（P>0.05）。观察至两月,平均生存期A组明显低于B、C两组,B、C两组无明显差异。死亡动物解剖结果显示肿瘤肝内、肺及腹腔转移广泛转移。结论:1.兔肝VX2移植瘤为供血丰富的巨块型实体瘤,生长速度快,成模周期短,是研究原发性肝癌经HIFU+UCA治疗效果及并发症较好的的模型。2.高强度聚焦超声可造成治疗局部皮肤不同程度的烧伤,可引起肝功能的一过性损害,短期内可恢复正常。3.HIFU联合UCA消融兔肝VX2移植瘤周围2mm、4mm内的正常组织时,兔肝肿瘤的生长率、远处脏器的转移、动物生存期无明显差异,但较单纯切除肿瘤组明显降低。4.在HIFU联合UCA消融兔肝VX2移植瘤周围2mm内的正常组织时,HIFU治疗效果可明显提高,因此,消融肿瘤及其周围2mm的正常肝组织为HIFU联合UCA治疗肿瘤时较适宜的消融范围。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 文献回顾
• 正文
• 第一部分兔肝VX2 移植瘤模型的构建
• 1 材料和方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 主要试剂
• 1.3 试剂配制
• 2 方法
• 2.1 VX2 肿瘤细胞株的扩增及荷瘤兔的制备
• 2.2 兔肝VX2 肿瘤模型的制备
• 2.3 观察指标
• 2.4 统计分析
• 3 结果
• 3.1 VX2 肿瘤细胞形态
• 3.2 VX2 肿瘤的体内成瘤的病理特征
• 3.3 成瘤率
• 3.4 肿瘤体积及肿瘤生长率
• 4 讨论
• 5 小结
• 第二部分 HIFU联合超声造影剂消融兔肝VX2 瘤周围不同范围组织的疗效研究
• 1 材料
• 1.1 实验动物模型
• 1.2 主要仪器设备
• 1.3 主要试剂
• 1.4 试剂配制
• 2 方法
• 2.1 实验分组
• 2.2 治疗方式及过程
• 2.3 HIFU设备及治疗参数设定
• 2.4 标本处理及HE染色
• 3 结果判定及观察指标
• 3.1 术后动物一般观察
• 3.2 治疗后组织病理学特征
• 3.3 治疗后2 周实验兔肝转移、肺转移、腹腔转移的评估
• 3.4 实验动物肝功能改变
• 3.5 治疗后肝原位移植瘤生长及坏死的评估
• 3.6 各组动物的平均生存期及其差异
• 3.7 统计处理
• 4 实验结果
• 4.1 实验动物的一般观察
• 4.2 治疗后组织病理学特征
• 4.3 治疗后2 周实验兔肝转移、肺转移、腹腔转移的评估
• 4.4 实验动物肝功能改变
• 4.5 治疗后肝原位移植瘤生长状况评估
• 4.6 各组动物的平均生存期及其差异
• 5 讨论
• 6 小结
• 小结
• 参考文献
• 附录
• 个人简历和研究成果
• 致谢