从多个阴虚病变模型研究阴虚证机理

论文摘要

阴虚证是中医学中一个重要的证型,是指因阴液亏耗,滋润濡养功能和制约阳热功能低下,而产生以燥、热、升、动为特征的病理状态。人体是一个复杂的整体,中医学的“阴”有着广泛的物质和功能基础,阴虚证广泛见于临床各科疾病,在不同的疾病,不同的年龄,存在不同的病理生理改变。因此,很难用一项或二项所谓“黄金指标”来特异地反映阴虚证的本质,这意味着必须多系统、多层次来进行阴虚证机理的探讨。 本研究结合课题组的研究方向,①通过连续4W以温燥、辛热、利水中药组成的耗阴复方予小鼠灌服制备阴虚证小鼠模型,观察动物模型皮肤中透明质酸及其调控因素的变化;②参照皮肤光老化模型,通过连续6W高强度中长波段紫外线UVA、UVB照射小鼠背部裸露区皮肤,模拟外感热邪消耗阴液病变,观察与皮肤病变密切相关的基质金属蛋白酶及其金属蛋白酶组织抑制因子的表达,及补阴方药对上述病变的作用;③体外培养小鼠皮肤成纤维细胞,观察耗阴复方血清对成纤维细胞合成糖胺多糖的影响。通过上述三方面与皮肤相关的阴虚模型病理变化侧重反映阴虚证滋润濡养功能低下相关的病理改变;④通过4W连续24h光照抑制幼鼠褪黑素分泌,制备性成熟期前肾阴虚大鼠模型,观察其神经、内分泌变化及补阴方药的干预作用;⑤运用去卵巢手术加灌服耗阴中药复方制备更年期肾阴虚大鼠模型,观察其神经内分泌的变化;⑥以基因芯片技术观察更年期肾阴虚模型大鼠下丘脑基因表达谱的变化。通过上述三方面研究侧重反映阴虚证在生长发育和衰老过程中相关的病理改变。综合整体、细胞、基因多个层次,研究多个阴虚证模型相关系统的病变,期望对阴虚证的现代研究内容有多所创新,并为相关疾病防治药物或保健品的开发提供一些思路和方法。 通过实验研究,发现①连续4W以耗阴中药复方灌服制备的阴虚证模型小鼠皮肤中透明质酸含量、血液中表皮生长因子含量同步下降,血液中皮质酮有升高趋势。经补阴方药治疗后,此种病变得以逆转,说明阴虚证病理改变与皮肤间质透明质酸的减少,及其促生长因素——表皮生长因子含量的减少,降解因素皮质酮含量的增多密切相关; ②连续6W高强度中长波段紫外线UVA、UVB照射可致小鼠裸露部位皮肤萎缩,基质金属蛋白酶1和基质金属蛋白酶3高表达,而金属蛋白酶组织抑制因子表达受抑,胶原降解;而同期补阴方药治疗可部分改善此种病变。从造模因素与中医学中外感热毒的相关性,及从补阴方药的疗效反推,此种动物模型反映了外感阳热邪气所致皮肤阴虚病理改变的部分机理;

论文目录

• 引言
• 第一部分: 文献研究
• 一、中医学对阴虚证的认识
• 二、阴虚证的现代研究
• 三、阴虚证动物模型研究概述
• 四、皮肤中透明质酸的生理功能及与阴液关系的理论探讨
• 五、皮肤光老化病变与阴虚病变的关联性探讨
• 六、青春期前性早熟肾阴虚证与更年期综合征肾阴虚证研究概述
• 七、褪黑素与肾阴关系的理论探讨
• 八、基因芯片技术及其在中医学研究中的应用
• 九、Affmetrix芯片特色概述
• 第二部分: 实验研究
• 一、阴虚证模型小鼠皮肤中透明质酸，血液中EGF、COR含量变化，及补阴方药的作用
• （一） 材料与方法
• （二） 结果
• （三） 讨论
• 二、补阴方药对光老化模型小鼠皮肤MMP-1、MMP-3、TIMP-1的作用
• （一） 材料与方法
• （二） 结果
• （三） 讨论
• 三、耗阴中药血清和养阴中药血清对小鼠皮肤成纤维细胞合成蛋白多糖的作用
• （一） 材料与方法
• （二） 结果
• （三） 讨论
• 四、持续光照对离乳后大鼠内分泌影响的动态观察
• （一） 材料与方法
• （二） 结果
• （三） 讨论
• 五、抑制性成熟前大鼠褪黑素分泌对神经内分泌的影响，及补阴方药的作用
• （一） 材料与方法
• （二） 结果
• （三） 讨论
• 六、更年期综合征肾阴虚证模型大鼠病理改变，及大豆异黄酮联合褪黑素的作用
• （一） 材料与方法
• （二） 结果
• （三） 讨论
• 七、更年期综合征肾阴虚证模型大鼠下丘脑基因表达谱研究
• （一） 材料与方法
• （二） 结果
• （三） 讨论
• 第三部分: 结语与展望
• 一、研究结论
• 二、本论文的创新点
• 三、进一步的研究展望
• 参考文献
• 附录
• 1、褪黑素检测步骤
• 2、皮肤组织MMP-1、MMP-3、TIMP-1免疫组化步骤
• 3、附图
• ① 持续光照实验图
• ② UVA、UVB照射实验图
• ③ 基因芯片数据散点图
• 致谢