论文摘要
目的:研究抑肽酶对凝血酶诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）IL-8表达和核因子κB（NF-κB）活性的影响。方法:将培养的HUVECs分为空白对照组、凝血酶组、以及800KIU/ml（半量）和1600KIU/ml（全量）抑肽酶组预处理1h,然后以凝血酶（4U/ml）诱导刺激作用。ELISA测定细胞培养上清液中IL-8含量;荧光实时定量PCR检测IL-8mRNA表达,扩增产物进行熔解曲线图和琼脂糖电泳分析;采用激光共聚焦显微镜观察NF-κBp65在细胞胞质和胞核的分布情况。结果:⑴凝血酶明显刺激HUVECs分泌IL-8和IL-8mRNA表达,细胞中游离的NF-κB增加并促进其核转位（P<0.01,P<0.01）。⑵半量和全量抑肽酶均能减少凝血酶诱导HUVECs IL-8的分泌和IL-8 mRNA的表达（P<0.01,P<0.01）,且对细胞内游离的NF-κB产生和核转位具有明显抑制作用（P<0.01,P<0.01）,两抑肽酶组间的抑制作用没有明显差异（P>0.05）。结论:在体外细胞培养实验中,半量和全量抑肽酶均能够减少凝血酶诱导HUVECs的IL-8表达,该作用与其抑制细胞内活化的NF-κB核转位有关。
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