补肾对骨髓形成肝细胞及其基因表达谱的影响

论文摘要

目的:观察补肾（左归丸）对小鼠骨髓形成肝细胞及其基因表达谱的影响,研究补肾生髓成肝的分子机制,揭示“肾生骨髓,髓生肝”的科学内涵。 方法:采用交叉性别骨髓移植模型,雌性BALB/C小鼠随机分为补肾组（左归丸）、补气血组（八珍汤）和对照组（生理盐水）,接受9.0Gy 60Co源γ射线照射后,经尾静脉注射输入同种系雄性小鼠骨髓细胞,骨髓移植后分别给予左归丸、八珍汤、生理盐水7g·kg-1·d-1灌胃,给药2、4、6个月后处死动物,取肝组织标本。通过荧光原位杂交检测肝组织切片中雄性性别决定基因Sry与白蛋白mRNA双阳性细胞（雄性骨髓来源的肝细胞）,计算各组骨髓转化为肝细胞的阳性细胞率,所得数据用SPSS统计软件进行统计分析。选用小鼠基因表达谱寡核苷酸芯片,提取液氮冻存肝组织的总RNA,利用反转录酶合成掺有荧光标记的cDNA探针,将探针与基因表达谱芯片杂交以观察实验小鼠肝组织基因表达谱的变化,筛选样本之间杂交信号比值有差异表达的基因,所得数据用Microsoft Access、Microsoft Excel软件处理。 结果:比较各组小鼠不同时点阳性细胞率,发现补肾组、补气血组和对照组的阳性细胞率均随着骨髓移植时间的延长而增加,移植后6个月时间点骨髓转化为肝细胞的阳性细胞率与前两个时间点相比显著升高（P<0.01）。同一时间点不同组小鼠骨髓转化为肝细胞的阳性细胞率有显著差异,骨髓移植后2个月时补肾组阳性细胞率高于补气血组和对照组（P<0.01）,移植后4个月时补肾组阳性细胞率高于补气血组（P<0.01）,移植后6个月时补肾组阳性细胞率高于补气血组和对照组（P<0.01）。各实验小鼠在骨髓移植6个月后的肝组织的基因表达谱显著不同,对照组小鼠相对于正常雌性小鼠的差异表达基因有865条,已知功能基因有447条,其中上调基因92条、下调基因355条。补肾组小鼠相对于对照组的差异表达基因有1147条,已知功能基因有533条,其中上调基因264条、下调基因269条。 结论:补肾（左归丸）能够促进骨髓形成肝细胞,效果明显优于补气血（八珍汤）和对照组。补肾促进骨髓形成肝细胞的作用机制可能在于调节全身机能和改善肝脏微环境,有利于骨髓细胞移行至肝脏并转化为肝细胞,影响基因表达谱湖北中医学院2002级硕士研究生学位论文的变化可能是补肾生髓成肝的分子机制。关健词:补肾左归丸骨髓移植荧光原位杂交基因芯片基因表达谱资金项目:本研究受国家自然科学基金（30271562）资助。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩略语
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 1.补肾生髓成肝的理论探讨
• 1.1 “肾生骨髓”的科学内涵
• 1.2 “髓生肝”的科学内涵
• 1.3 “补肾生髓成肝’’的理论认识及其意义
• 2.补肾促进骨髓形成肝细胞及其机制探讨
• 2.1 补肾促进骨髓形成肝细胞
• 2.2 骨髓形成肝细胞的分子机制探讨
• 2.3 补肾促进骨髓形成肝细胞的分子机制探讨
• 参考文献
• 文献综述
• 1.左归丸的临床应用及实验研究进展
• 2.骨髓间充质干细胞研究进展
• 致谢