预防性应用天然蒙脱石对新生大鼠坏死性小肠结肠炎肠损伤的保护作用及机制探讨

论文摘要

目的探讨预防性应用天然蒙脱石对新生鼠坏死性小肠结肠炎（NEC）模型肠损伤保护作用及可能机制,为预防性应用天然蒙脱石防治NEC提供科学依据。方法SD新生鼠出生后48小时开始给予鼠配方奶喂养,100%氮气缺氧90秒,4℃冷刺激10分钟,每天2次,连续3天建立新生鼠NEC模型。按析因设计,32只新生SD大鼠随机分成4组,每组动物各8只。A组为NEC模型组并在出生48小时起每日给予天然蒙脱石灌胃（0.6g/kg/d）;B组为NEC模型组,未添加天然蒙脱石;C组为对照组,未添加天然蒙脱石;D组为对照组并给予天然蒙脱石（0.6g/kg/d）;在最后一次缺氧、冷刺激后24小时空腹断头处死大鼠,留取十二指肠下端至直肠上端肠管进行肠细胞凋亡率检测及电镜观察。再选取32只新生SD大鼠,按上述分组和实验方法,同期留取十二指肠下端至直肠上端肠管检测PAF、TNF-α含量。所有新生鼠均留取回盲部近端肠管进行肠组织损伤评分。采用流式细胞仪检测肠细胞凋亡率,ELISA法检测肠组织PAF、TNF-α含量（pg/mg prot）。采用SPSS11.0统计学软件进行统计分析,α=0.05为显著性检验标准。结果[1]开始造模后,A、B组新生SD大鼠相继出现腹泻、腹胀、萎靡、活动减少,生长减慢;透射电镜显示肠黏膜出现大量凋亡细胞,有些形成凋亡小体,A组程度较轻。A、B、C和D组肠组织损伤评分（?x±s ）分别为1.42±0.36、3.54±0.50、0.13±0.17和0.17±0.18;肠细胞凋亡率（%）分别为11.6±4.6、27.6±9.9、4.8±2.9和3.6±3.8。各组之间肠组织损伤评分、肠组织细胞凋亡率差别有显著意义;与B组相比,A组肠组织损伤评分和肠组织细胞凋亡率明显降低,但仍高于C、D两组,差异均有显著意义。[2]A、B、C和D组肠组织PAF含量（?x±s ）分别为385.0±308.0、1663.2±576.1、40.8±40.4和37.1±33.1;TNF-α含量为46.4±15.1、258.1±281.7、13.2±12.2和12.4±8.8。各组之间肠组织PAF、TNF-α含量差别均有显著意义;B组肠组织PAF、TNF-α含量明显高于C、D组;与B组相比,A组肠组织PAF、TNF-α含量明显降低;差异均有统计学意义。[3]析因设计方差分析显示:肠组织损伤评分、肠组织细胞凋亡率及肠组织PAF、TNF-α含量均受造模和预防性应用天然蒙脱石两因素影响,造模与预防性应用天然蒙脱石之间存在交互作用;新生大鼠肠损伤程度与肠组织细胞凋亡率、肠组织PAF、TNF-a含量呈显著正相关（r凋亡率=0.853,rPAF=0.852,rTNF-α=0.839,p均<0.01）。结论预防性应用天然蒙脱石可以降低新生NEC大鼠肠损伤程度,可能通过减少其肠细胞凋亡率,降低肠组织PAF、TNF-α含量,下调对机体有害的炎症级联反应,从而减轻肠损伤,降低新生大鼠发生NEC危险性。

论文目录

• 英文缩写对照表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 新生鼠坏死性小肠结肠炎肠细胞凋亡及天然蒙脱石保护作用
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 预防性应用天然蒙脱石对新生鼠坏死性小肠结肠炎肠损伤及肠组织 PAF、TNF-α 影响
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 结束语
• 致谢
• 综述 肠黏膜屏障与新生儿坏死性小肠结肠炎
• 附录