论文题目: RGS4与GR结构域相互作用的初步研究
论文类型: 硕士论文
论文专业: 临床检验诊断学
作者: 王霞
导师: 李萍
关键词: 结构域,酵母双杂交
文献来源: 四川大学
发表年度: 2005
论文摘要: 糖皮质激素的多种生理和药理效应可能与其非基因组效应有关,糖皮质激素受体(Glucocorticoid Receptor,GR)参与某些非基因组效应的信号转导,G蛋白信号转导调节因子(Regulator of G protein signaling 4,RGS4)与GR之间的相互作用可能是调节这一效应的重要途径之一。本研究拟采用酵母双杂交技术探讨RGS4与GR之间是否存在相互作用,进而明确相互作用的确切位点。 该研究工作分为两个部分:1、利用酵母双杂交技术研究RGS4与GR各结构域之间的相互作用;2、利用GST-pulldown技术研究RGS4及GR各结构域蛋白之间相互作用。 采用SD大鼠肝组织RNA,构建RGS4蛋白全编码框表达质粒作为诱饵蛋白表达质粒,并构建GR(AB、CD、EF、C、D)结构域的AD质粒,成功地建立了酵母双杂交体系。酵母双杂交结果显示,RGS4全编码框表达质粒转染酵母细胞后无自激活作用,GR各个
论文目录:
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 RGS4与GR结构域间相互作用的酵母双杂交研究
前言
实验一 酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定
1、实验材料
2、实验方法
3、实验结果
实验二 GR各个结构域的构建
1、实验材料
2、实验方法
3、实验结果
实验三 RGS4与GR结构域间的相互作用的酵母双杂交研究
1、实验材料
2、实验方法
3、实验结果
讨论
参考文献
第二部分 RGS4及GR各结构域蛋白之间相互作用的GST-pulldown研究
前言
实验一 RGS4原核表达载体pGEX4T-1-RGS4的构建
1、实验材料
2、实验方法
3、实验结果
实验二、pGEX4T-1-RGS4原核表达载体的诱导表达和鉴定
1、实验材料
2、实验方法
3、实验结果
实验三、RGS4与GR结构域之间的GST pulldown研究
1、实验材料
2、实验方法
3、实验结果
讨论
参考文献
文献综述
参考文献
全文总结
致谢
发布时间: 2007-01-22
参考文献
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