论文摘要
目的观察波动性高糖对人血管内皮细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法波动性高浓度葡萄糖(5.5或20mmol/L)与恒定性高浓度葡萄糖(20mmol/L)作用于人脐静脉内皮细胞(human umbilical veinendothelial cells,HUVECs)7天,应用Annexin V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率,Hoechst33258荧光染色观察凋亡形态学变化,比色法测定培养液中超氧化物岐化酶(Superoxide Dismutase SOD)活力、丙二醛(Malondialdehyde MDA)含量,Western blot测定磷酸化JNK的水平。结果波动性高浓度葡萄糖与恒定性高浓度葡萄糖均可导致HUVECs出现凋亡的形态学变化。波动性高浓度葡萄糖组的凋亡率高于恒定性高浓度葡萄糖组(P＜0.05)。5.5或7.8mmol/L葡萄糖组凋亡率与对照组相比无明显差异(P＞0.05)。培养液中超氧化物岐化酶活力在波动性高浓度葡萄糖组与恒定性高浓度葡萄糖组均较对照组降低(P＜0.05),波动性高浓度葡萄糖组降低最为明显(P＜0.05);培养液中丙二醛的含量在波动性高浓度葡萄糖组与恒定性高浓度葡萄糖组均较对照组升高(P＜0.05),波动性高浓度葡萄糖组升高最为明显(P＜0.05)。抗氧化剂维生素C能显著降低波动性高浓度葡萄糖导致的细胞凋亡率(P＜0.05)。磷酸化JNK的水平在波动性高浓度葡萄糖组与恒定性高浓度葡萄糖组均较对照组升高,波动性高浓度葡萄糖组升高最为明显(P＜0.05)。JNK特异性抑制剂SP600125能显著降低波动性高浓度葡萄糖导致的细胞凋亡率(P＜0.05)。抗氧化剂维生素C能显著抑制波动性高浓度葡萄糖导致的磷酸化JNK水平的升高(P＜0.05)。结论波动性高糖较恒定性高糖更易促发培养的人脐静脉内皮细胞凋亡,其机制可能为波动性高糖环境下氧化应激水平增高,进而激活JNK信号转导途径促进细胞凋亡。维生素C能阻断氧化应激途径,抑制波动性高糖诱导的血管内皮细胞凋亡。
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