PTEN、HIF-1α和VEGF在喉鳞癌中的表达及其临床病理意义

论文摘要

背景喉癌是耳鼻咽喉科常见的恶性肿瘤，其中喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma，LSCC）占全部喉癌的96％，近年来其发病率有逐渐增高的趋势。如同其他肿瘤性疾病一样，喉鳞癌的确切发生机制迄今尚不十分明确，随着肿瘤分子生物学技术的迅速发展已证明恶性肿瘤的发生是一个长期的、多因素形成的、分阶段的过程，其中癌基因的激活与抑癌基因的失活及细胞内信号传导的紊乱被认为与喉鳞癌的发生和转移密切相关。与细胞骨架蛋白Tensin同源在肿瘤第10号染色体有缺失的磷酸脂酶（phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten，PTEN）基因是近年来发现的一种具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因，缺氧诱导因子-1α（Hypoxia Inducible Factor-lalpha，HIF-1α）是缺氧条件下重要的转录因子，血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor，VEGF）是HIF-1重要的下游靶基因产物。国内外关于PTEN、HIF-1α与VEGF蛋白表达的改变与肿瘤的发生、分化、生物学行为、预后等关系的研究相继发表，但至今仍无统一观点，为探讨PTEN、HIF-1α与VEGF在喉鳞癌发生发展中的作用及三者之间的关系，本研究采用免疫组化方法检测喉鳞癌组织中PTEN蛋白、HIF-1α蛋白与VEGF蛋白表达与喉鳞癌临床病理特征的关系及三者表达的相关性，旨在探讨三者在喉鳞癌发生发展中的生物学意义及相关分子病理学机制，为喉鳞癌的诊断、治疗和预后判断，尤其是为进一步开展喉鳞癌基因靶向治疗提供理论依据。材料与方法1．临床病例资料：57例喉鳞癌标本作为研究对象。所有病例临床资料完整，术前未经化疗、放疗等，术后经病理确诊为喉鳞癌。另取10例癌旁正常组织标本作对照组。2．试验方法和结果判定：采用免疫组化SP法检测上述喉鳞癌组织及癌旁正常组织标本中PTEN蛋白、HIF-1α蛋白、VEGF蛋白的表达。PTEN蛋白以细胞质出现棕黄色颗粒为阳性染色，HIF-1α蛋白以胞浆中出现棕黄色颗粒为阳性染色，VEGF蛋白主要定位于细胞浆，胞浆含有棕褐色颗粒的肿瘤细胞计为阳性细胞。按照染色强度和阳性细胞数综合进行结果判定。3．统计学分析：应用SPSS13.0统计软件进行分析。用卡方检验进行差异显著性分析。三者的关联应用列联表的关联性分析，检验标准取α=0.05。结果1．PTEN蛋白阳性染色主要分布于肿瘤细胞质。喉鳞癌组织中蛋白阳性表达率61.40％，正常喉上皮组织蛋白阳性表达率100％，两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）。PTEN蛋白在高分化喉鳞癌阳性表达率84.85％、中低分化喉鳞癌阳性表达率29.16％，两组比较有显著性差异（P＜0.01）。在喉鳞癌患者临床分期Ⅰ～Ⅱ期蛋白阳性表达率为81.48％，临床分期Ⅲ～Ⅳ期阳性表达率为43.33％，两者比较差异显著，P＜0.01。淋巴结转移者PTEN蛋白阳性表达率40.91％，无淋巴结转移者蛋白阳性表达率为74.29％，二者比较差异有统计学意义（P＜0.05）。2．HIF-1α蛋白阳性染色定位于肿瘤细胞浆，肿瘤间质部分着色。喉鳞癌组织蛋白阳性表达率78.95％，正常组织阳性表达率20.00％，P＜0.01，二者比较差异有统计学意义。在临床分期Ⅰ～Ⅱ期HIF-1α蛋白阳性表达率62.96％，Ⅲ～Ⅳ期蛋白阳性表达率93.33％，P＜0.01，两者比较差异显著。有淋巴结转移者蛋白阳性表达率95.45％，无淋巴结转移者阳性表达率68.57％，P＜0.05，二者比较差异显著。3．VEGF蛋白阳性表达于肿瘤细胞胞浆，亦表达于间质细胞和血管内皮细胞。喉鳞癌中蛋白阳性表达率为75.43％，正常组织中阳性表达率为20.00％，P＜0.01，两组比较差异显著。高分化喉鳞癌VEGF蛋白阳性表达率为63.63％，中低分化喉鳞癌蛋白阳性表达率为91.66％，二者差异显著有统计学意义（P＜0.05）。有淋巴结转移者阳性表达率为95.45％，无淋巴结转移者蛋白阳性表达率为62.85％，两者比较，P＜0.05，差异有统计学意义。4．PTEN蛋白表达阳性病例中，HIF-1α蛋白表达阳性率为68.57％，PTEN蛋白表达阴性病例中HIF-1α蛋白阳性率为94.45％，经统计学分析，结果显示列联系数r=0.306，P=0.015＜0.05，两种蛋白表达有关联性。HIF-1α阳性病例中，VEGF蛋白的阳性表达率为84.44％，高于HIF-1α阴性病例中VEGF的阳性表达率41.67％，列联系数r=0.376，P=0.002＜0.01，两种蛋白在喉鳞癌中的表达有关联性。结论1．HIF-1α蛋白、VEGF蛋白在喉鳞癌中高的表达；PTEN蛋白在喉鳞癌中的低表达或表达缺失，表明HIF-1α、VEGF和PTEN三种蛋白的改变是喉鳞癌发生、发展中常见的分子事件。2．PTEN蛋白表达与喉鳞癌的临床分期、组织学分化程度和淋巴结转移密切相关。随着临床分期的进展PTEN蛋白表达呈下降趋势，而喉鳞癌组织分化程度越高，PTEN蛋白阳性表达率越高，有淋巴结转移者PTEN蛋白表达低于无淋巴结转移者。说明该基因的失活和／或缺失随喉鳞癌的发展而递增，并参与了喉鳞癌的分化转移。推测PTEN基因失活和／或缺失可能是喉鳞癌发病机制之一。3．HIF-1α蛋白表达与喉鳞癌的临床分期和淋巴结转移相关。随着患者临床分期进展程度增加，HIF-1α蛋白阳性表达率升高，有淋巴结转移者蛋白阳性表达率高于无淋巴结转移者。提示HIF-1α蛋白高表达在喉鳞癌的浸润转移中发挥一定作用。4．VEGF蛋白表达与喉鳞癌的组织学分化程度和淋巴结转移相关。喉鳞癌患者组织分化程度越低，恶性程度越高，VEGF蛋白阳性表达越高。且有淋巴结转移者VEGF蛋白阳性表达高于无淋巴结转移者。提示VEGF高表达可能参与喉鳞癌中血管形成，在喉鳞癌的生长分化和转移中起重要作用。5．PTEN、HIF-1α、VEGF蛋白表达异常与喉鳞癌发生发展密切相关，三者既相互独立，又紧密关联；推测可能由于PTEN基因失活和／或缺失，蛋白表达产物下调，失去对PI3K／Akt信号途径的负调控，增强HIF-1α转录活性，诱导VEGF蛋白表达，肿瘤血管生成，从而促进肿瘤生长浸润。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 论文部分 PTEN、HIF-1α和VEGF在喉鳞癌中的表达及其临床病理意义
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 附图
• 参考文献
• 综述部分 HIF-1转录活性的调控及在肿瘤研究中的进展
• 参考文献
• 中英文缩略语
• 致谢