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清胆泻热法治疗鼻渊机理研究

2020-11-28阅读(962)

清胆泻热法治疗鼻渊机理研究

论文摘要

目的:通过动物实验在分子生物学、形态学等方面,从基因水平上探讨清胆泻热法治疗鼻渊的作用机制,从而更准确地指导临床用药。方法:将健康SD大鼠随机分为①空白组;②模型组:③中药低剂量组;④中药中剂量组;⑤中药高剂量组;⑥青霉素Ⅴ钾组。急性鼻-鼻窦炎模型依据叶菁报道的方法造模。造模7天后,空白组和模型组按5ml·kg-1·d-1灌服无菌水,其余各组分别灌服相应的药物。从造模第1天开始,观察动物一般情况变化,pH值、体温及体重变化等,着重观察鼻部症状、鼻分泌量。用药7天后,处死动物,每组随机选取6只大鼠。用ELISA法检测各组大鼠血清中C-反应蛋白（CRP）浓度。在超净工作台上取鼻黏膜后,提取mRNA,并逆转录为cDNA,用RT-PCR法测定白细胞介素2mRNA（IL-2 mRNA）、白细胞介素4 mRNA（IL-4 mRNA）、白细胞介素10 mRNA（IL-10 mRNA）、干扰素-γ（IFN-γmRNA）的表达.在透射电镜下观察鼻黏膜的病理形态变化。结果:1.模型组大鼠鼻腔分泌物pH值与空白组相比,有显著性升高（P＜0.01）。用药7天后,各治疗组药物均能降低鼻腔分泌物pH值。其中以中药低剂量组效果最明显（P＜0.01）。2.模型组大鼠血清CRP浓度与空白组相比,有显著性升高（P＜0.01）。用药7天后,各治疗组药物均能降低血清CRP浓度。其中以中药低、中剂量组效果最明显（P＜0.01）.3.用药7天后,除中药高剂量组外,其余各治疗组药物均能使鼻黏膜组织IL-2 mRNA及IL-10 mRNA的相对表达量升高,以中药低剂量组及青霉素Ⅴ钾组效果最明显（P＜0.01）。4.用药7天后,除中药高剂量组外,其余各治疗组药物均能使鼻黏膜组织IL-4 mRNA的相对表达量升高,以中药低剂量组效果最明显（P＜0.01）。5.用药7天后,各治疗组物均能使鼻黏膜组织的IFN-γmRNA相对表达量降低,以中药低、中剂量组效果最明显（P＜0.01）。6.用药7天后,透射电镜观察显示:除中药高剂量组外,其余各治疗组药物均能使鼻黏膜纤毛形态结构逐步恢复正常,以中药低、中剂量组效果最明显。结论:1.清胆泻热可以降低鼻分泌物pH值至接近正常值,以保证保鼻腔内环境的协调。2.清胆泻热可以降低血清CRP浓度,抑制或杀死病原微生物,消除炎症反应.3.清胆泻热可以增强鼻黏膜IL-2 mRNA的表达,作用于T细胞,增强细胞免疫,提高机体抗感染能力.4.清胆泻热可以增强鼻黏膜IL-4 mRNA和IL-10 mRNA的表达,发挥其抗炎活性.5.清胆泻热可以抑制鼻黏膜IFN-γmRNA的表达,从而抑制相关炎性因子的合成。6.清胆泻热可以减轻内质网扩张、线粒体肿胀,促进鼻黏液纤毛传输系统恢复正常.我们推测吉雷开窍汤可能以清胆泻热法通过改善机体内环境:扶助正气、驱邪外出,发挥治疗作用。

论文目录

  • 中文摘要
  • Abstract
  • 缩略词表
  • 引言
  • 实验研究
  • 1 实验材料
  • 1.1 实验动物
  • 1.2 试剂及药品
  • 1.3 重要器械及其他材料
  • 2 实验方法
  • 2.1 造模及分组方法
  • 2.2 给药方法
  • 2.2 动物死亡报告
  • 3 观察指标及检测方法
  • 3.1 一般情况观察
  • 3.2 鼻腔分泌物的pH值测定
  • 3.3 血清C—反应蛋白（CRP）浓度测定
  • 3.4 鼻黏膜组织IL-2 mRNA的表达RT-PCR检测
  • 3.5 鼻黏膜组织IL-4 mRNA的表达RT-PCR检测
  • 3.6 鼻黏膜组织IL-10 mRNA的表达RT-PCR检测
  • 3.7 鼻黏膜组织IFN-γ mRNA的表达RT-PCR检测
  • 3.8 鼻黏膜组织透射电镜观察
  • 3.9 统计学分析
  • 4 实验结果及分析
  • 4.1 一般情况观察
  • 4.2 用药7天后各组大鼠鼻分泌物pH值测定结果
  • 4.3 用药7天后各组大鼠血清C—反应蛋白（CRP）浓度
  • 4.4 用药7天后各组大鼠鼻黏膜组织IL-2 mRNA相对表达量
  • 4.5 用药7天后各组大鼠鼻黏膜组织IL-4 mRNA相对表达量
  • 4.6 用药7天后各组大鼠鼻黏膜组织IL-10 mRNA相对表达量
  • 4.7 用药7天后各组大鼠鼻黏膜组织IFN-γ mRNA相对表达量
  • 4.8 用药7天后各组大鼠鼻黏膜组织透射电镜观察结果
  • 5 讨论
  • 5.1 关于动物模型
  • 5.1.1 动物及造模方法
  • 5.1.2 关于细菌菌种的选择
  • 5.2 祖国医学对急性鼻-鼻窦炎的认识
  • 5.2.1 古代文献记载
  • 5.2.2 分型及病因病机
  • 5.2.3 急性鼻-鼻窦炎的中医治疗
  • 5.3 现代医学对急性鼻-鼻窦炎的认识
  • 5.3.1 发病机理
  • 5.3.2 急性鼻-鼻窦炎的西医治疗
  • 5.4 胆肺假说初探
  • 5.4.1 胆与鼻的关系
  • 5.4.2 肺与鼻的关系
  • 5.4.3 胆与肺
  • 5.4.4 胆腑郁热与鼻渊
  • 5.4.5 鼻渊宜从胆治
  • 5.5 吉雷开窍汤方解
  • 5.6 清胆泻热法治疗急性鼻-鼻窦炎大鼠作用机理探讨
  • 5.6.1 清胆泻热可以降低急性鼻-鼻窦炎大鼠鼻分泌物pH值
  • 5.6.2 清胆泻热可以降低急性鼻-鼻窦炎大鼠血清CRP浓度
  • 5.6.3 清胆泻热可以增强急性鼻-鼻窦炎大鼠鼻黏膜IL-2 mRNA的表达
  • 5.6.4 清胆泻热可以增强急性鼻-鼻窦炎大鼠鼻黏膜IL-4 mRNA的表达
  • 5.6.5 清胆泻热可以增强急性鼻-鼻窦炎大鼠鼻黏膜IL-10 mRNA的表达
  • 5.6.6 清胆泻热可以抑制急性鼻-鼻窦炎大鼠鼻黏膜IFN-γ mRNA的表达
  • 5.6.7 清胆泻热可以促进急性鼻-鼻窦炎大鼠鼻黏液纤毛传输系统恢复正常
  • 5.7 清胆泻热可能促进了机体内环境的稳定
  • 5.7.1 保持酸碱平衡稳定
  • 5.7.2 维护细胞"社会和谐"
  • 5.8 清胆泻热可能开通玄府治疗鼻渊
  • 5.8.1 玄府普遍存在
  • 5.8.2 玄府郁闭可导致鼻渊发生
  • 5.8.3 清胆泻热中药复方可开通玄府
  • 结论
  • 问题与展望
  • 1 动物模型与中医证型
  • 2 微观探索与宏观研究
  • 参考文献
  • 鼻渊国内外研究现状
  • 致谢
  • 附图
  • 公开发表的学术论文、专著及科研成果

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