论文摘要
吸烟被认为是慢性阻塞性肺疾病最重要的危险因素。烟草烟雾通过多种化学物质引起肺组织复杂的炎症反应,多种免疫细胞、炎症介质、蛋白酶、活性氧化物参与其中,导致了以气道慢性炎症和阻塞为中心的肺部病变。在这个过程中粘液产生过多和排出障碍在气道阻塞中的作用不可忽视。粘液浓缩而聚集在气道直接增加了肺的非弹性阻力,而粘液的成分和纤毛功能又与气道表面含水量有密切关系。研究发现水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)表达于气道粘膜上皮组织,是水在跨上皮转运中的重要通道蛋白,对气道表面液体平衡产生重要的调节作用,因此研究吸烟所致的肺部炎症环境中AQP4表达的变化对慢性阻塞性肺疾病气道中粘液分泌和排出机制进一步阐明具有重要意义。活性氧-抗氧化物失衡的重要性在吸烟致炎的诸多机制中业已得到公认,香烟烟雾本身含有以及炎症细胞产生的活性氧化性物质广泛参与了组织的损伤过程。气道上皮组织增殖活跃,更新速度快,因而更易受到氧化物质的损伤,初步探讨表达于气道上皮组织的AQP4及粘蛋白5AC(mucin 5AC,MUC5AC)与活性氧化物的关系可为今后进一步明确活性氧-抗氧化物失衡在慢性阻塞性肺疾病中的地位和水通道蛋白在肺组织表达调控的机制提供研究思路。目的研究烟草烟雾吸入对大鼠肺组织AQP4和MUC5AC的表达的影响及其与支气管肺泡灌洗液内一氧化氮代谢物水平的相关关系,探讨氧化应激对肺部水转运和粘液分泌的影响。方法复制香烟烟雾吸入大鼠模型,免疫组化法观察AQP4在肺组织内的表达,平均光密度法比较模型组和空白组大鼠AQP4的表达差异;半定量逆转录聚合酶链式反应法检测肺组织内AQP4及MUC5AC mRNA的表达水平;硝酸还原酶法测定各组大鼠支气管肺泡灌洗液内一氧化氮代谢产物的浓度,Pearson法分析模型组AQP4、MUC5AC mRNA的表达水平与支气管肺泡灌洗液内一氧化氮代谢物浓度之间的相关关系。结果1、成功复制香烟烟雾吸入致大鼠肺气肿模型2、免疫组织化学染色显示:AQP4在空白对照组呈强阳性染色,在模型组呈弱阳性染色,两者平均光密度值分别为35.39±5.37和26.07±4.35,有显著的统计学差异(p<0.05)。3、模型组动物和空白对照组动物支气管肺泡灌洗液(BALF)一氧化氮代谢产物含量分别为7.04±1.50,18.52±5.89,差异具有统计学意义(p<0.01)4、一氧化氮代谢产物含量与AQP4mRNA的表达之间呈显著负相关系(r=-0.798,p<0.01);与MUC5ACmRNA表达呈正相关系(r=0.857,p<0.01)。5、AQP4mRNA与MUC5AC mRNA表达呈负相关系(r=-0.708,p<0.05)。结论吸烟导致大鼠肺组织氧化应激反应增强,使AQP4表达下降进而影响气道内水的转运,使MUC5AC基因表达上调。
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