IL-24对卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制作用研究

论文摘要

背景：卵巢癌是人类最难治愈的肿瘤之一。传统的治疗方法包括手术、化疗、放疗及综合治疗等均无法明显提高患者的五年存活率，因此探讨新的更有效的卵巢癌的治疗方法十分重要和迫切。近年认为基因治疗最具有临床应用前景。白细胞介素-24（IL-24）是一种新发现的具有明显抗肿瘤作用而对正常细胞没有影响的细胞因子，成为肿瘤基因治疗的研究热点。国内外探讨IL-24用于卵巢癌基因治疗的研究不多。为此在前期实验工作中以构建好了真核表达载体pcDNA3.1（-）-IL-24并测序鉴定的基础上，设计了本实验。目的：探讨IL-24对卵巢癌细胞系SKOV3增殖的影响。方法：用电转染法将重组真核表达载体pcDNA3.1（-）-IL-24稳定转染SKOV3细胞，经G418筛选后获得阳性细胞克隆；用RT-PCR方法检测鉴定目的基因mRNA表达；四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞体外增殖状况。同时以转染空载体pcDNA3.1（-）的SKOV3细胞和野生型SKOV3细胞作为空载体对照和阴性对照。结果：1．转染48h换用G418选择性培养基后，大部分转染pcDNA3.1（-）-IL-24及pcDNA3.1（-）的SKOV3细胞（分别用IL-24转染组和空载体转染组表示）在一周后死亡，少数细胞继续生长增殖，在选择培养基中生长2周有抗性细胞集落形成；而野生型SKOV3细胞（阴性对照组表示）则在一周后完全裂解死亡。2．基因转染后，IL-24转染组、空载体转染组及阴性对照组SKOV3细胞抽提总的RNA，经RT-PCR检测表明，IL-24转染组SKOV3细胞在600+bp处出现阳性条带，空载体转染组及阴性对照组SKOV3细胞未见相似的阳性条带。凝胶图像分析仪分析IL-24mRNA相对表达水平，结果显示空载体转染组和阴性对照组SKOV3细胞中IL-24mRNA相对表达水平为0；IL-24转染组SKOV3细胞中IL-24mRNA相对表达水平为0.18±0.03。3．IL-24转染组、空载体转染组及阴性对照组SKOV3细胞MTT比色法测定，三组之间的OD值差异有显著性（P＜0.001）。生长曲线图中后两者生长曲线相似，IL-24转染组细胞增殖受到明显抑制。结论：1．I L-24对SKOV3细胞的体外增殖有抑制作用；2．IL-24用于卵巢癌的基因治疗具有潜在价值；

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩略语表
• 第一章 前言
• 第二章 材料和方法
• 2.1 材料
• 2.2 实验方法
• 2.3 统计学方法
• 第三章 结果
• 3.1 转染细胞的筛选
• 3.2 RT-PCR检测IL-24mRNA在各组SKOV3细胞中的表达
• 3.3 MTT法检测各组SKOV3细胞的体外增殖能力
• 3.4 各组SKOV3细胞的生长曲线
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 附图
• 参考文献
• 综述
• 致谢