食药用菌多糖提取及抗肿瘤活性研究

论文摘要

本实验所采用三种食药用菌菌种鸡腿菇（Coprinus comatus）,云芝（Coriolus versicolor）,裂褶菌（Schizophyllum commune）均来自中国农业科学院农业资源与农业区划研究所野外采集并驯化。实验以菌丝产量为目标,探索三种食药用菌的液体发酵培养基优良配方。通过对菌丝体和发酵液多糖的提取,研究不同种类食药用菌多糖得率。以裂褶菌为对象,对其菌丝体与发酵液多糖提取工艺进行了优化。采用Lewis肺癌实体瘤实验模型,研究不同种类多糖对肿瘤抑制率的高低,探索不同种类多糖的抗肿瘤功效,为食药用菌的开发利用提供参考数据。主要研究结果:1.在适宜的培养条件下,通过对三种食药用菌培养基配方比较实验,筛选出适合各种食药用菌生长、菌丝体产量高的液体培养基优良配方。①鸡腿菇液体培养基配方:蔗糖30g,玉米粉20g,麸皮40g,KH2PO41g,MgSO40.5g,水1000mL。②云芝液体培养基配方:马铃薯200g,蔗糖20g,KH2PO41g,（NH4）2SO41g,水1000mL。③裂褶菌液体培养基配方:马铃薯200g,麸皮100g,葡萄糖30g,酵母膏1g,KH2PO45g,MgSO42.5g,VB10.1g,CaCO3 3g,水1000mL。2.通过对三种食药用菌菌丝体和发酵液的多糖提取研究,结果表明相同的提取方法,不同食药用菌菌丝体、发酵液多糖提取率均有显著差异,其中鸡腿菇菌丝体多糖提取率最高,为16.5%,裂褶菌发酵液多糖提取率最高,为65%。3.测定三种药用菌多糖中多糖含量和蛋白质含量,三种菌丝体多糖含量由高到低依次是鸡腿菇菌丝体多糖＞裂褶菌丝体多糖＞云芝菌丝体多糖,三种发酵液多糖具多糖含量由高到低依次是鸡腿菇发酵液多糖＞裂褶菌发酵液多糖＞云芝发酵液多糖。4.测定裂褶菌菌丝体多糖最佳提取工艺为:将菌丝体冷冻干燥后,超声波处理10 min、超声波功率600W、浸提时间4h、浸提比1:30。发酵液多糖最佳提取工艺为:超声波功率600W、超声波处理时间10 min、醇沉时间8h、醇沉比1:5。5.通过三种食药用菌菌丝体粗多糖对Lewis肺癌的体内抑制作用的研究,表明三种食药用菌菌丝体多糖对肿瘤均有一定抑制效果。其中,对Lewis肺癌的最大抑制率是云芝高剂量组为86.8%。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1 食药用菌液体发酵培养研究概况
• 1.1 食药用菌液体发酵培养
• 1.2 食药用菌液体发酵产物的用途
• 2 食药用菌多糖研究概况
• 2.1 食药用菌多糖
• 2.2 食药用菌多糖的提取
• 2.3 多糖的纯化与结构分析
• 2.4 真菌多糖的活性研究
• 3 三种药用菌开发利用现状
• 3.1 鸡腿菇
• 3.2 云芝
• 3.3 裂褶菌
• 4 论文研究目的及主要内容
• 第二章 培养基配方筛选
• 1 实验材料
• 1.1 供试菌种
• 1.2 复合PDA培养基
• 1.3 液体培养基配方
• 1.4 实验仪器
• 2 实验方法
• 2.1 母种复壮
• 2.2 平板培养
• 2.3 液体培养
• 2.4 数据分析
• 3 结果与分析
• 3.1 平板培养
• 3.2 液体培养
• 4 讨论
• 第三章 多糖提取和含量测定
• 1 实验材料
• 1.1 供试材料
• 1.2 实验试剂
• 1.3 实验仪器
• 2 实验方法
• 2.1 菌丝体多糖的提取
• 2.2 发酵液多糖的提取
• 2.3 提取率计算
• 2.4 多糖含量测定
• 2.5 蛋白含量测定
• 3 结果与分析
• 3.1 多糖提取率
• 3.2 同种药用菌多糖的多糖和蛋白含量测定结果
• 3.3 三种菌丝体多糖的的多糖和蛋白含量测定结果
• 3.4 三种发酵液多糖的的多糖和蛋白含量测定结果
• 4 讨论
• 第四章 裂褶菌多糖提取工艺的优化
• 1 实验材料
• 1.1 供试材料
• 1.2 实验试剂
• 1.3 实验仪器
• 2 实验方法
• 2.1 不同干燥法对菌丝体多糖得率的影响
• 2.2 菌丝体多糖提取工艺正交试验
• 2.3 发酵液多糖提取工艺正交试验
• 2.4 多糖含量测定采用苯酚-硫酸法
• 3 结果与分析
• 3.1 不同干燥法对菌丝体多糖得率的影响
• 3.2 菌丝体多糖提取工艺优化
• 3.3 发酵液多糖提取工艺优化
• 4 讨论
• 4.1 菌丝体多糖
• 4.2 发酵液多糖
• 第五章 三种菌丝体多糖对LEWIS肺癌的抑制作用
• 1 实验材料
• 1.1 菌丝体多糖
• 1.2 供试小鼠
• 1.3 瘤株
• 1.4 阳性对照药
• 2 实验方法
• 2.1 接种
• 2.2 分组和给药方式
• 2.3 给药时间
• 2.4 评价指标与数据分析
• 3 结果与分析
• 3.1 菌丝体多糖对Lewis肺癌荷瘤小鼠瘤重的影响
• 3.2 菌丝体多糖对Lewis肺癌荷瘤小鼠胸腺的影响
• 3.3 菌丝体多糖对Lewis肺癌荷瘤小鼠脾脏的影响
• 3.4 赤芝菌丝体多糖对Lewis肺癌荷瘤小鼠各指标的影响
• 3.5 云芝菌丝体多糖对Lewis肺癌荷瘤小鼠各指标的影响
• 3.6 裂褶菌菌丝体多糖对Lewis肺癌荷瘤小鼠各指标的影响
• 3.7 三种食药用菌菌丝体多糖对Lewis肺癌荷瘤小鼠体重的影响
• 4 讨论
• 第六章 全文结论
• 1 液体发酵培养基的筛选
• 2 多糖提取和含量测定
• 3 多糖提取工艺优化
• 4 多糖活性研究
• 参考文献
• 英文缩略表
• 致谢
• 作者简历