水稻ERF类转录因子Os922的功能初步分析

论文摘要

糖在植物的生长发育、新陈代谢中起到关键作用,目前有越来越多的证据表明糖信号也参与到了抗病抗逆的应答反应。比如植物激素是抗病抗逆途径中的重要信号分子,糖能够参与赤霉素和脱落酸的合成,脱落酸、赤霉素和细胞分裂素也能调控糖的代谢和传导。而且,在各种植物激素的应答反应中,糖还能调控其中某些成分的表达,植物激素也能调控参与糖应答反应的基因的表达。 ERF是植物特异的转录因子,属于AP2家族中的ERF亚族,最早被鉴定为乙烯应答元件结合蛋白（EREBP）,目前发现其参与了各种抗病抗逆途径。 通过PCR的方法从水稻cDNA文库中克隆到了一个水稻ERF类的转录因子基因Os922,并构建增强表达载体pCoU-Os922。 使用根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）EHA105将其转化粳稻（Oryza sativa L.）秀水11的幼胚,得到了转基因水稻植株。在转化中对共培养光照、抑菌方式、再生培养基成份等条件进行优化,发现使用16h光照/8h黑暗的共培养光照条件能够明显地提高转化效率。 对转基因水稻植株的PCR和Southern分析表明,Os922基因已整合到受体基因组中。T1代转基因植株表现出了对葡萄糖的敏感性,而且叶绿素含量降低,表明Os922基因与糖信号传导有关。

论文目录

• 摘要
• 第一章 文献综述
• 1.1 ERF转录因子
• 1.1.1 简介
• 1.1.2 结构
• 1.1.3 功能
• 1.1.4 进化
• 1.2 糖和植物激素之间的相互作用
• 1.2.1 糖对基因表达的调控
• 1.2.2 糖和乙烯（ethylene）
• 1.2.3 糖和脱落酸（Abscisic acid）
• 1.2.4 糖和赤霉素（gibberellins）
• 1.2.5 糖和细胞分裂素（cytokinins）
• 1.2.6 糖和生长素（auxin）
• 1.3 研究背景和立题依据
• 第二章 超表达Os922基因的转基因水稻的获得
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 实验材料
• 2.1.2 Os922的超表达载体构建和鉴定
• 2.1.3 pCoU-Os922重组质粒转化农杆菌
• 2.1.4 农杆菌介导转化水稻
• 2.1.5 转基因水稻的分子检测
• 2.2 结果
• 2.2.1 pCoU-Os922重组载体的鉴定
• 2.2.2 pCoU-Os922转化农杆菌鉴定
• 2.2.3 转pCoU-Os922水稻的获得
• 2.2.4 转基因水稻的分子检测
• 2.3 讨论
• 2.3.1 光照共培养对转化的影响
• 2.3.2 抑菌方式对转化的影响
• 2.3.3 再生培养基成分对转化的影响
• 0代表型分析'>2.3.4 转基因植株的获得和T₀代表型分析
• 第三章 Os922基因功能初步分析
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 转基因水稻各种处理
• 3.1.2 叶绿素的测定
• 3.2 结果
• 1代的表型分析'>3.2.1 转pCoU-Os922水稻T₁代的表型分析
• 3.2.2 葡萄糖敏感性分析
• 3.2.3 叶绿素分析
• 3.2.4 抗胁迫分析
• 3.3 讨论
• 1代白化现象'>3.3.1 转pCoU-Os922水稻T₁代白化现象
• 1代的葡萄糖敏感性'>3.3.2 转pCoU-Os922水稻T₁代的葡萄糖敏感性
• 3.3.3 转pCoU-Os922水稻的叶绿素分析
• 3.3.4 结论
• 参考文献
• 附录
• 致谢