焦磷酸测序技术在高危型HPV分型中应用的研究

焦磷酸测序技术在高危型HPV分型中应用的研究

论文摘要

人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)属于乳多空病毒科的乳头瘤病毒属,HPV于1949年由Strauss在电镜下发现,是一种小的环状双链DNA病毒,其基因组长度约8000bp。目前已经确定的HPV亚型有100余种,依其感染的上皮所在部位分为皮肤型HPV和生殖道上皮型HPV,大约30多种型别可感染妇女生殖道,其中约20种与肿瘤相关。依据HPV不同亚型与肿瘤发生的危险性高低分为低危险型和高危险型HPV,由于不同亚型HPV的致病机制和致癌危险性各不相同,因此对HPV各亚型进行分型检测有重要的临床意义。目前,临床上通过荧光实时PCR技术对HPV进行分型检测,但该方法检测通量低,难以满足临床上同时检测多个亚型的需要,此外通过核酸杂交的方法检测HPV亚型目前在临床广为应用,但其假阴性和假阳性较多,灵敏性和特异性有待提高。在分子诊断领域,最直接而明确的技术是基因测序,传统的基因测序方法是通过Sanger终止法进行的,该方法一次只能读取单个基因的序列,而对于有众多基因亚型感染的疾病,很难获得理想的测序结果。焦磷酸测序技术是近年来发展起来的一种新的序列分析技术,它通过核苷酸和模板结合后释放的焦磷酸,引发酶的级联反应,促使荧光素发光并进行检测,其最大优点是可以实现高通量、高效率并同时检测多至5种以上亚型,对于当前日益增多的混合型HPV感染无疑具有广阔的临床应用前景。目的:探讨利用焦磷酸测序技术同时检测HPV多个高危亚型的方法,提高HPV及其混合型感染检测的灵敏度和准确度。方法:设计高度特异的HPV基因亚型测序引物,并对其进行分组;通过高保真PCR获得HPV片段,并进行焦磷酸测序分析。结果:设计了18个HPV高危亚型的特异测序引物,并对其进行了分组测序,证明对HPV高危亚型的混合感染可以分3组进行测序。结论:焦磷酸测序技术是一种简便、高效、高通量、高灵敏度、高准确度的HPV分型检测方法。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 缩略词表
  • 前言
  • 焦磷酸测序技术的原理
  • 一、焦磷酸测序技术的原理
  • 二、焦磷酸测序技术的反应体系
  • 三、焦磷酸测序技术的示意图
  • 第一部分 HPV基因组生物信息学分析及测序引物的设计
  • 第二部分 HPV基因片段的扩增
  • 材料
  • 方法
  • 结果
  • 讨论
  • 第三部分 通过焦磷酸测序技术进行HPV分型
  • 材料
  • 方法
  • 结果
  • 讨论
  • 小结与展望
  • 参考文献
  • 综述
  • 论文发表目录
  • 致谢
  • 相关论文文献

    • [1].持续性高危型人乳头瘤病毒感染的处理[J]. 中国实用妇科与产科杂志 2020(07)
    • [2].宫颈高危型人乳头瘤病毒感染与阴道微生态及局部细胞免疫的关系[J]. 中国医药导报 2020(18)
    • [3].使用宫颈环形电切术治疗宫颈上皮内瘤变合并高危型人乳头瘤病毒感染的临床治疗效果分析[J]. 中国农村卫生 2020(16)
    • [4].维生素D受体基因多态性与高危型人乳头状瘤病毒感染的关系研究[J]. 中国卫生检验杂志 2020(18)
    • [5].农村妇女高危型HPV感染647例临床分析[J]. 基层医学论坛 2019(14)
    • [6].江苏盛泽医院2016年-2017年不同高危型HPV分布情况观察[J]. 临床检验杂志(电子版) 2018(02)
    • [7].女性高危型人乳头瘤病毒感染分布情况研究[J]. 中国实用妇科与产科杂志 2017(01)
    • [8].探讨聚焦超声治疗高危型人乳头瘤病毒感染宫颈炎的临床疗效[J]. 世界最新医学信息文摘 2016(99)
    • [9].子宫内膜癌术后应用激素治疗对早期高危型患者预后的影响[J]. 临床医学 2016(11)
    • [10].7258例体检女性高危型人乳头瘤病毒的感染现状及年龄分布特点[J]. 中国医药导报 2016(09)
    • [11].包皮环切术在防治夫妻共患高危型人乳头瘤病毒感染中的作用[J]. 中国医药导报 2016(16)
    • [12].濮阳市高危型人乳头瘤病毒感染状况及分布特征[J]. 中国卫生标准管理 2016(15)
    • [13].聚焦超声治疗50例高危型人乳头瘤病毒感染宫颈炎疗效观察[J]. 上海医药 2016(21)
    • [14].女性高危型人乳头瘤病毒感染2501例调查[J]. 南方医科大学学报 2015(10)
    • [15].高危型妊娠滋养细胞肿瘤的评估与治疗[J]. 中国癌症杂志 2015(07)
    • [16].高危型HPV DNA检测应用于体检中的意义分析[J]. 人人健康 2016(23)
    • [17].HPV检测的6个误区[J]. 人人健康 2017(03)
    • [18].高危型人乳头瘤病毒整合在宫颈癌变中的作用机制和临床检测进展[J]. 健康之路 2017(06)
    • [19].金波栓治疗高危型HPV感染的疗效观察[J]. 健康之路 2017(10)
    • [20].15种高危型人乳头瘤病毒核酸检测方法验证及人群感染情况调查[J]. 国际检验医学杂志 2020(01)
    • [21].病程日记模式健康教育对高危型HPV持续感染的影响[J]. 中国卫生工程学 2018(06)
    • [22].陕西汉中地区2070例女性高危型HPV感染及危险因素[J]. 公共卫生与预防医学 2019(03)
    • [23].5654例女性高危型人乳头瘤病毒感染情况分析[J]. 中国优生与遗传杂志 2019(09)
    • [24].580例体检妇女高危型人乳头状瘤病毒感染状况调查[J]. 泰山医学院学报 2018(07)
    • [25].高危型人乳头瘤病毒检测在宫颈癌筛查中的价值[J]. 包头医学院学报 2016(12)
    • [26].自贡地区女性15种高危型人乳头瘤病毒感染情况分析[J]. 国际检验医学杂志 2017(03)
    • [27].阴道微生态异常与高危型人乳头瘤病毒感染的相关性研究[J]. 中国妇产科临床杂志 2017(02)
    • [28].重组人干扰素对慢性宫颈炎并高危型人乳头瘤病毒感染的治疗价值分析[J]. 中国医药指南 2017(13)
    • [29].女性高危型人乳头瘤病毒感染者配偶病毒感染状况及危险因素[J]. 中国性科学 2017(10)
    • [30].女性17种高危型人乳头瘤病毒感染情况分析[J]. 实用医技杂志 2017(09)

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