论文摘要
附红细胞体病是由附红细胞体(Eperythrozoon)寄生于多种动物的红细胞表面、血浆及骨髓中引起的一种人畜共患病。关于附红细胞体的分类地位目前仍有争议,传统的分类学方法将附红细胞体列为立克次氏体,但是近年来根据16S rRNA基因的系统发育分析的结果表明,附红细胞体更接近于支原体(Mycoplasma)。直接镜检是目前临床上诊断该病的主要手段,包括鲜血压片和涂片染色,但该方法假阳性较多见。动物实验也是确诊的手段之一,但所费时间太久。血清学诊断方法包括间接血凝试验(IHA)、补体结合试验(CFT)和酶联免疫吸附试验(ELISA)等,但由于附红细胞体抗体水平的变化没有规律而常出现假阴性的结果。鉴于上述原因,为了建立特异准确的诊断方法,本研究首先进行了羊附红细胞体病的PCR诊断方法的研究。为建立特异、敏感、快速的羊附红细胞体诊断方法,利用原核生物16S rRNA基因通用引物扩增羊附红细胞体16S rRNA基因序列,并进行序列比对和系统发育树分析。根据所测得的羊附红细胞体16S rRNA基因序列,设计一对种特异性引物,建立了羊附红细胞体的PCR诊断方法。特异性试验和敏感性试验表明,此诊断方法只能特异性地扩增羊附红细胞体的16S rRNA基因序列的特异性片段,检测羊附红细胞体最低DNA量为4.5fg。利用该方法对湖北省羊附红细胞体感染情况进行了流行病学调查,结果显示阳性感染率为17.48%,说明羊附红细胞体在湖北省的流行情况比较广泛。为了验证新药二丙酸咪唑苯脲对猪附红细胞体病的治疗效果,本试验以PCR检测阳性的断奶仔猪为对象,注射免疫抑制剂诱导发病后进行治疗,试验设二丙酸咪唑苯脲高中低剂量组,血虫净治疗组,阳性对照组和阴性对照组,结果证明二丙酸咪唑苯脲在2.0mg/kg剂量时,对附红细胞体有一定的抑制和杀灭作用,效果最好,优于血虫净。本实验的结果为临床应用二丙酸咪唑苯脲治疗猪附红细胞体病提供了重要依据。近几年来,国内有关猪病的报道似乎以猪附红细胞体病为多,凡遇到高烧、黄疸、皮肤发红等情况往往都以附红细胞体病定论。在调查和防治工作中血液涂片镜检发现了一种异常现象,血液中存在一种新的疑似病原,有人暂命名为“猪血鞭毛虫病”。该疑似病原体存在于病猪血液中,有多种形态,其中典型的呈纺锤形、两极长有鞭毛。病猪的临床症状类似于猪附红细胞体病。随着病情的发展,常在发生区域流行蔓延,病猪对早期用过的一些治疗药物耐受或产生抗药性,严重影响了一些农村地区养猪业的发展。为此,本试验对该病的病原学、临床表现等进行了研究,并探讨了该病的治疗方法,为揭示这一现象提供科学依据。