论文摘要
目的: 扩增耐辐射奇球菌（Deinococcus radiodurans）锰超氧化物歧化酶（Mn-SOD）基因,构建pET-SOD重组子,实现Mn-SOD在大肠杆菌中的高效表达,通过金属离子亲和层析纯化表达蛋白,并对纯化蛋白的性质进行初步研究,为后续探讨耐辐射奇球菌的耐辐射机制以及对SOD的开发应用奠定基础。 方法: 本研究分为三部分: 1.耐辐射奇球菌锰超氧化物歧化酶基因原核表达载体的构建:用PCR方法自D.radiodurans基因组中扩增Mn-SOD目的片段。将该基因与原核表达质粒载体pET-30a（+）连接,构建重组质粒pET-SOD,并转化克隆宿主菌E.coli DH5α,利用卡那霉素抗性筛选阳性克隆,质粒小量提取后,双酶切和基因序列测定鉴定重组质粒。 2.超氧化物歧化酶融合蛋白的表达及纯化:重组质粒pET-SOD转化表达宿主菌E.coli BL21（DE3）,IPTG诱导SOD融合蛋白表达,SDS-PAGE分析目的蛋白表达情况:通过镍金属离子亲和层析对SOD融合蛋白进行纯化,SDS-PAGE检测蛋白纯度和亚基分子量。 3.超氧化物歧化酶融合蛋白的性质研究:包括纯化产物总蛋白含量测定,SOD活性测定,SOD种类鉴定,SOD紫外吸收光谱测定,SOD的pH稳定性、温度稳定性研究。
论文目录
相关论文文献
- [1].神奇的“超氧化物歧化酶”[J]. 科学养生 2014(07)
- [2].超氧化物歧化酶[J]. 新商务周刊 2014(08)
- [3].浅谈超氧化物歧化酶来源[J]. 饮食科学 2018(02)
- [4].超氧化物歧化酶(SOD)专著即将面世[J]. 食品与药品 2009(07)
- [5].黄腐酸促进超氧化物歧化酶形成的作用机制探究[J]. 腐植酸 2017(03)
- [6].人工栽培北虫草中超氧化物歧化酶提取工艺的优化实验[J]. 抗感染药学 2017(04)
- [7].含锰超氧化物歧化酶基因结构及其转录调控[J]. 河北科技师范学院学报 2012(04)
- [8].人锰超氧化物歧化酶的扩增和表达研究[J]. 药物生物技术 2009(04)
- [9].氧化自由基清除剂超氧化物歧化酶与疾病[J]. 中国公共卫生 2014(10)
- [10].锰超氧化物歧化酶的研究进展[J]. 公共卫生与预防医学 2010(04)
- [11].超氧化物歧化酶研究及应用概况[J]. 广东蚕业 2008(01)
- [12].植物中超氧化物歧化酶的提取及应用[J]. 中国洗涤用品工业 2017(08)
- [13].嗜热栖热菌重组锰超氧化物歧化酶的性质[J]. 台湾海峡 2012(01)
- [14].植物超氧化物歧化酶的研究及其在基因工程中的应用[J]. 山西农业科学 2008(03)
- [15].银杏叶提取物治疗迟发性运动障碍与血浆锰超氧化物歧化酶的关系研究[J]. 中国神经精神疾病杂志 2019(11)
- [16].超氧化物歧化酶的应用、研究及制备工艺的改进[J]. 边疆经济与文化 2012(11)
- [17].锰超氧化物歧化酶对神经系统作用的研究综述[J]. 现代生物医学进展 2009(14)
- [18].利培酮与氯氮平对精神分裂症患者超氧化物歧化酶的影响及其与疗效的关系[J]. 医药导报 2008(11)
- [19].超氧化物歧化酶模拟物的合成研究进展[J]. 合成化学 2018(10)
- [20].镉离子对水丝蚓超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性的影响[J]. 中国农学通报 2015(08)
- [21].关于召开“全国SOD学术研讨会”的征文通知[J]. 食品与药品 2009(05)
- [22].原核微生物铁超氧化物歧化酶的分子进化[J]. 微生物学杂志 2009(03)
- [23].舌鳞状细胞癌中锰超氧化物歧化酶的表达及意义[J]. 中华口腔医学研究杂志(电子版) 2009(05)
- [24].糖尿病视网膜病变与超氧化物歧化酶活性值的关系[J]. 武警医学 2018(08)
- [25].铜对动物超氧化物歧化酶活性的影响及可能的作用途径[J]. 中国畜牧杂志 2013(21)
- [26].发芽和提取条件对玉米胚芽中超氧化物歧化酶的诱导作用[J]. 食品科学 2011(05)
- [27].异丙醇法提取超氧化物歧化酶的工艺优化研究[J]. 安徽农学通报 2018(21)
- [28].不同微生态制剂对蛋鸡机体超氧化物歧化酶调节机制的影响[J]. 动物营养学报 2015(10)
- [29].重组锰超氧化物歧化酶工程菌摇瓶发酵条件的优化[J]. 集美大学学报(自然科学版) 2012(01)
- [30].人锰超氧化物歧化酶基因剪接异构体的表达分析[J]. 生物技术通报 2010(03)
标签：耐辐射奇球菌论文; 锰超氧化物歧化酶论文; 基因克隆论文; 表达论文; 纯化论文;