中药姜黄组分芳姜黄酮诱导肿瘤细胞凋亡的研究

论文题目: 中药姜黄组分芳姜黄酮诱导肿瘤细胞凋亡的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 微生物学

作者: 季明杰

导师: 曲音波

关键词: 芳姜黄酮,细胞毒性,细胞凋亡,抗肿瘤药物,姜黄

文献来源: 山东大学

发表年度: 2005

论文摘要: 癌症严重威胁人类的生命。据世界卫生组织统计,全世界每年死于癌症的病人大约500多万,癌症治疗和预防的任务十分艰巨。药物治疗是癌症治疗的三大疗法之一。多年来人类一直在不断地进行抗肿瘤药物的研究,抗肿瘤药物的筛选是整个研究过程中很重要的一个环节,而进行药物的筛选首先离不开合理的筛选方法和系统。世界各国对抗肿瘤药物的筛选都非常重视,投入了大量的人力、物力和财力,每年都有大量的化合物待筛(合成物、天然产物和微生物发酵产物)。找到有效安全、副作用小的抗肿瘤药物一直是肿瘤药物研究者的追求目标。近年来,随着生命科学技术的进步发展,新的抗肿瘤药物不断涌现。有关肿瘤发生发展分子机制的研究表明,在恶性肿瘤细胞中,细胞内的各种基本过程是调节失控。这些过程包括:细胞周期的调控、信号传递通路的阻断、细胞凋亡、端粒的稳定性、血管生成及胞外基质的相互作用等。为研究具有特异性的抗肿瘤药物,利用现代肿瘤细胞生物学的最新发展,研究者将注意力转向寻找在癌症的病因学与病理过程起作用的特异的分子及药物靶点,如细胞凋亡诱导剂、信号传导阻滞剂、血管生成抑制剂等。细胞凋亡(apoptosis)是在基因调控下发生的细胞自杀式死亡。细胞在各种因素,如DNA损伤、细胞生存信号的缺失、细胞毒性药物和辐射等作用下,多种细胞凋亡基因表达发生改变,细胞发生一系列生物化学变化,某些蛋白酶活性提高,最终发生细胞凋亡。已有越来越多的实验证据表明细胞凋亡与肿瘤的发生、发展、治疗和预后密切相关。多种抗肿瘤药物主要通过诱导细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用,其效能与诱导细胞凋亡的能力密切相关。根据细胞凋亡的分子调控机制,选择性的诱导肿瘤细胞凋亡,以细胞凋亡调控因子为新的治疗靶点的抗肿瘤研究也取得了很多有意义的进展。

论文目录:

摘要

ABSTRACT

符号缩写说明

第一章 绪论

1.1 姜黄的化学成分及药理活性

1.1.1 姜黄简介

1.1.2 姜黄的化学成分

1.1.3 姜黄的药理作用与应用

1.2 天然药物的抗肿瘤作用机理

1.2.1 诱导肿瘤细胞凋亡

1.2.2 诱导细胞分化

1.2.3 杀伤肿瘤细胞

1.2.4 影响信号转导

1.2.5 调节生物机能提高免役力

1.2.6 逆转多药耐药

1.2.7 抗侵袭转移

1.3 细胞凋亡

1.3.1 细胞凋亡定义的提出

1.3.2 细胞凋亡的意义

1.3.3 细胞凋亡的形态学特征

1.3.4 细胞凋亡信号途径的分子机制

1.4 本研究的内容、目的和意义

参考文献

第二章 姜黄中芳姜黄酮的分离纯化与鉴定

2.1 材料仪器与方法

2.1.1 材料来源

2.1.2 药品

2.1.3 仪器

2.1.4 甲醇提取

2.1.5 正己烷萃取

2.1.6 硅胶柱粗分离

2.1.7 高效液相层析分离纯化硅胶粗提取物

2.1.8 芳姜黄酮的鉴定

2.2 结果与讨论

参考文献

第三章 MTT法检测芳姜黄酮的细胞毒性

3.1 材料与方法

3.1.1 细胞系和培养基

3.1.2 培养基配制

3.1.3 细胞培养

3.1.4 芳姜黄酮储存液配置

3.1.5 仪器

3.1.6 MTT试验

3.1.6.1 最佳细胞浓度试验

3.1.6.2 细胞毒性试验

3.2 结果与讨论

参考文献

第四章 芳姜黄酮诱导不同细胞凋亡的研究

4.1 材料与方法

4.1.1 试剂

4.1.2 细胞系和培养基

4.1.3 仪器

4.1.4 DNA片段化试验

4.1.5 流式细胞仪分析

4.1.6 PI染色激光共聚焦显微镜检测芳姜黄酮诱导的细胞凋亡

4.2 结果与讨论

4.2.1 芳姜黄酮诱导DNA片段化(DNA fragmentation)

4.2.2 流式细胞仪分析芳姜黄酮诱导的细胞凋亡

4.3.3 AO染色激光共聚焦显微镜观测芳姜黄酮诱导的细胞凋亡

参考文献

第五章 芳姜黄酮诱导肿瘤细胞凋亡机制的初步研究

5.1 材料与方法

5.1.1 试剂

5.1.2 仪器

5.1.3 流式细胞仪分析

5.1.4 比色法分析caspase-3、caspase-8酶活

5.1.5 荧光分光光度法分析caspase-9酶活

5.2 结果与讨论

5.2.1 流式细胞术分析细胞周期阻滞

5.2.2 Caspases试剂盒检测芳姜黄酮处理K-562和U-937细胞酶活变化

参考文献

攻读学位期间已发表和待发表的学术论文

致谢

发布时间: 2006-05-30

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