氯化甲基汞诱导C6胶质瘤细胞凋亡及其机制的研究

氯化甲基汞诱导C6胶质瘤细胞凋亡及其机制的研究

论文摘要

甲基汞是严重危害人类健康的环境污染物,其进入人体后主要侵害神经系统,尤其是中枢神经系统。而胶质细胞是甲基汞在脑内最大的负荷体,它在甲基汞所致的神经毒性中起了关键的调节作用。但是其毒性作用的分子机制是亟待研究解决的问题。本研究以C6 胶质瘤细胞为模型,采用细胞生物学,分子生物学,免疫学和流式细胞技术,探讨低剂量甲基汞对其的毒性作用,以及细胞内活性氧、线粒体膜电位、钙离子和Bcl-2 蛋白水平的变化,探讨其作用机制。实验结果表明:氯化甲基汞可以引起C6 胶质瘤细胞的凋亡,对其有强烈的毒性作用,它可以刺激细胞内活性氧生成增加,破坏钙稳态,使线粒体膜电位消失,还发现细胞内Bcl-2 蛋白表达的变化。本研究对于深入探讨甲基汞神经毒作用机制,特别是对胶质细胞毒性作用的机制具有重要的理论意义。

论文目录

  • 英文缩写
  • 第一章 引言
  • 第二章 文献综述
  • 1. 环境汞污染及其危害
  • 1.1 汞污染的现状
  • 1.2 汞及其化合物对人体的危害
  • 2. 凋亡的研究进展
  • 2.1 细胞凋亡的研究历史
  • 2.2 细胞凋亡的一般概念
  • 2.3 细胞凋亡通路的研究进展
  • 2.4 凋亡的执行
  • 第三章 材料和方法
  • 1. 实验材料
  • 1.1 实验主要器材及试剂
  • 1.2 主要仪器
  • 1.3 实验细胞
  • 2. 实验方法
  • 2.1 细胞培养
  • 2.2 CCK-8 测定 MMC 对 C6 鼠胶质瘤细胞的毒性作用
  • 2.3 流式细胞法测定 MMC 诱导 C6 胶质瘤细胞的凋亡
  • 2.4 流式细胞技术测定ROS 的变化
  • 2.5 流式细胞技术测定线粒体膜电位的变化
  • 2.6 用激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子水平的变化
  • 2.7 细胞蛋白提取
  • 2.8 蛋白浓度测定
  • 2.9 免疫印迹法测定Bcl-2 蛋白的表达
  • 2.10 统计学方法
  • 第四章 实验结果
  • 1. MMC 对 C6 鼠胶质瘤细胞的毒性作用
  • 2. MMC 诱导 C6 胶质瘤细胞凋亡作用
  • 3. MMC 诱导 C6 胶质瘤细胞内自由基水平变化的研究
  • 4. MMC 对 C6 细胞线粒体膜电位水平的作用
  • 5. MMC 对 C6 细胞内钙离子水平
  • 6.MMC 对 Bcl-2 蛋白表达的作用
  • 第五章 讨论
  • 1. 模型建立
  • 2. CCK-8 试剂盒测定MMC 对 C6 胶质瘤细胞毒性
  • 3.PI-Hochest33258 双染观测 MMC 诱导 C6 胶质瘤细胞凋亡的作用
  • 4. MMC诱导C6胶质瘤细胞内自由基产生
  • 5. MMC对C6胶质瘤细胞线粒体膜电位的作用
  • 6. MMC诱导C6胶质瘤细胞钙失衡
  • 7. MMC 诱导C6 胶质瘤细胞Bcl-2 蛋白表达的变化
  • 结论
  • 参考文献
  • 中文摘要
  • Abstract
  • 致谢
  • 导师及作者简介
  • 相关论文文献

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