论文摘要
济宁青山羊是我国特有的羔皮用山羊品种,成熟早、繁殖力高是该品种的重要特征。母羊初配年龄为6月龄,初产母羊平均产羔率163.1%,一年产两胎,或两年产三胎,平均产羔率293.7%,最多时一胎可产6~7羔。肥大细胞(MC)是山羊子宫及输卵管内一种重要的局部免疫性的细胞,我们通过对山羊子宫肥大细胞的染色方法进行探讨,掌握一套完整的肥大细胞染色方法,从形态学的角度研究发情周期内子宫与输卵管肥大细胞的形态、分布、数量的变化规律,运用荧光分光光度计测定山羊子宫和输卵管中MC分泌的组织胺(HA)的含量,为进一步研究山羊的生殖免疫学提供形态学资料,从而为提高山羊的繁殖力充分利用其经济价值提供理论基础。试验一不同固定液和染色方法对山羊子宫和输卵管中MC染色效果的比较对山羊子宫样本采用四种不同的固定方法,分别为Carnoy氏液、10%中性福尔马林溶液、4%多聚甲醛溶液和Bouin氏液,应用改良甲苯胺蓝(MTB)染色法和阿尔辛蓝-番红花红(AB-S)染色法对处于间情期山羊子宫肥大细胞进行了组织化学特性和形态学研究。结果显示,山羊子宫组织采用Carnoy氏液固定,TB和AB-S染色对所有的肥大细胞均可获得良好的染色反应,但10%中性福尔马林,4%多聚甲醛,Bouin氏液固定的组织仅有少量肥大细胞着染。MTB和AB-S染色法均是山羊子宫肥大细胞良好的染色方法。试验二山羊发情周期中MC在子宫和输卵管中的变化应用改良甲苯胺蓝染色法观察了山羊发情周期四个阶段子宫和输卵管肥大细胞分布、形态和数量的变化规律,结果显示,肥大细胞呈圆形,椭圆形或不规则形,在子宫内主要分布在肌层,其次是固有层,子宫外膜中零星散在,子宫阜和子宫内膜上皮中没有。输卵管内肥大细胞在黏膜皱襞、肌层和外膜中均有分布。肥大细胞在发情后期有明显的脱颗粒现象。发情周期中子宫及输卵管肥大细胞数量变化为:发情后期>发情前期>间情期>发情期,子宫肌层MC数量各组间差异极显著(P<0.01),子宫固有层和输卵管内无显著变化。研究结果表明子宫肥大细胞的数量、形态随生理周期的变化而改变。试验三山羊发情周期中子宫角肥大细胞超微结构比较透射电镜观察济宁青山羊发情周期不同阶段(发情前期、发情期、发情后期、间情期)子宫肌层肥大细胞的超微结构,结果发现:子宫角MC表面有稀疏而长短不一的微绒毛。胞核位于中央或偏于一侧,核仁明显,染色质浓密沿核膜内侧分布。胞浆内充满大量电子密度不一的颗粒,分布不均,大小不一,尚可见线粒体、高尔基复合体及内质网等细胞器。发情周期不同阶段MC超微结构组成相似,但胞质中的颗粒电子密度各不相同。尤其是在发情后期,MC电子密度极低。表明肥大细胞在发情周期中确有脱颗粒现象,分泌介质或细胞因子。试验四山羊发情周期中HA在子宫和输卵管中的变化应用荧光分光光度计法观察了山羊发情周期四个阶段子宫和输卵管肥大细胞分泌的介质HA的变化规律。结果显示,发情周期中子宫及输卵管HA含量的变化为:发情后期>发情前期>间情期>发情期,子宫角HA含量在各组间差异显著(P<0.05),子宫颈、子宫体及输卵管内无显著变化。研究结果表明子宫角内HA的含量随生理周期的变化而改变。