小麦新品种川麦42低分子量谷蛋白亚基基因序列分析

小麦新品种川麦42低分子量谷蛋白亚基基因序列分析

论文摘要

本文以普通小麦(Triticum aestivum L.)Glu-D3位点基因编码的低分子量谷蛋白亚基序列设计的PCR引物,采用PCR方法从小麦新品种川麦42中分离出2个低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)基因,暂命名为LMWCM42-1和LMWCM42-2。推导氨基酸序列比较显示,LMWCM42-1与LMWCM42-2之间的相似性为81.76%,在N-末端重复区部分和C-末端区中存在着差异。其主要结果如下: 1.以普通小麦Glu-D3位点基因编码的低分子量谷蛋白亚基序列设计的PCR引物P1和P2,对川麦42总DNA进行扩增获得了约850bp左右的DNA片段,与预期的低分子量麦谷白基因编码区的长度接近。 2.克隆并测序后获得2个不同的亚基基因LMWCM42-1和LMWCM42-2。LMWCM42-1编码区全长846bp,编码281个氨基酸:LMWCM42-2编码区全长912bp,编码303个氨基酸:其在N、C端核苷酸组成上存在保守性,具有LMW-GS基因的典型结构特征。 3.序列比较分析显示,这2个序列与小麦族物种的低分子量谷蛋白亚基基因序列有较高的一致性。LMWCM42-1与GenBank中登录的低分子量谷蛋白序列AY831795有较高的一致性:而LMWCM42-2与GenBank中登录的低分子量谷蛋白序列AY831792、AY831790、AY831789、AY296753和AB062872序列结构高度相似。 4.聚类分析表明,LMWCM42-1和LMWCM42-2可能是由Glu-D3位点编码的。

论文目录

  • 1. 小麦低分子量谷蛋白研究概述
  • 1.1 研究历史
  • 1.2 分类
  • 1.3 染色体定位及等位变异
  • 1.4 基因编码区结构
  • 1.5 小麦近缘属种的低分子量谷蛋白基因
  • 1.6 小麦低分子量谷蛋白与面粉品质的关系
  • 1.7 己获知低分子量麦谷蛋白基因
  • 2. 材料和方法
  • 2.1 材料
  • 2.2 基因组DNA提取
  • 2.3 PCR引物设计、扩增基因组 DNA及电泳分析
  • 2.4 PCR产物回收、纯化
  • 2.5 连接
  • 2.6 感受态细胞的制备
  • 2.7 转化大肠杆菌
  • 2.8 阳性克隆筛选
  • 2.9 序列测定与比较分析
  • 3. 结果和分析
  • 3.1 PCR扩增、目的片段回收与T-载体克隆
  • 3.2 序列一致性比较
  • 3.3 LMWCM42-1与LMWCM42-2序列间的比较与分析
  • 4. 讨论
  • 4.1 LMWCM42-1与LMWCM42-2的类型
  • 4.2 LMWCM42-1与LMWCM42-2的聚类分析
  • 4.3 序列分析
  • 4.4 LMWCM42-1与LMWCM42-2序列结构与品质的关系
  • 参考文献
  • 致谢
  • 在读期间发表文章
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