论文摘要
目的随着全球性老龄化社会的发展,阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）已经成为一个严重威胁人类健康的卫生和社会问题。AD的致病核心是β-淀粉样蛋白（β-amyloid,Aβ）在大脑内的沉积。β-淀粉样蛋白（Aβ）在细胞外沉积形成老年斑（senile plaque,SP）是AD的主要神经病理学特征之一。以此为出发点,我们探讨天麻素在过表达淀粉样前提蛋白（amyloid precursor protein ,APP）的细胞系中抑制Aβ分泌的作用及其作用机制,并由此探讨一种治疗阿尔茨海默病的新思路。方法分别培养过表达APP的两株细胞系293sw和APP695,加入不同浓度的天麻素,用MTT法检测细胞的活力,并用倒置的显微镜观察细胞的形态,以确定有效的药物浓度。采用细胞免疫组化来观察天麻素对两株细胞的细胞膜稳定性的影响。收集两株细胞的培养基,用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测培养基中Aβ含量。分别提取细胞中的蛋白,用Western Blot的方法对胞内APP和IDE进行检测,观察APP和IDE含量的变化情况。收集两株细胞的培养基,用TCA-DOC的方法沉淀培养中Aβ,用Western Blot方法检测其含量的变化。结果通过上述的实验,我们发现,浓度在25-200 umol/l的天麻素对细胞没有造成细胞的死亡,与对照组相比,细胞的活力增强,各组细胞在24 h和48 h时贴壁良好,轴突较长,有树状分支,胞体和突起折光率好;与对照组相比,无胞体形态变化,轴突回缩,贴壁不良,细胞悬浮。ELISA和Western Blot实验显示,两株细胞中随着天麻素的浓度增加,培养基和胞内的Aβ含量均有明显的下降趋势。但胞内的IDE却无明显的增加。结论天麻素在两株过表达APP的293sw和APP695的细胞系中,能够抑制胞内APP的表达,促使胞外Aβ的降解,保护神经细胞,可能对阿尔茨海默病的治疗起着一定的作用。但是实验发现两株细胞中随着天麻素浓度的增加,IDE的含量均没有明显的改变,这说明天麻素抑制和降解Aβ不是通过此机制完成的。以上研究结果为阿尔茨海默病的治疗做出了积极的探索,可能为阿尔茨海默病的临床治疗提供了一个新的思路。