论文摘要
目的:了解 EGF 对未成熟卵母细胞体外成熟、受精及胚胎发展的影响。 方法:未成熟卵母细胞分别取自 hCG 刺激和未刺激的小鼠卵巢,将生殖泡(GV)期卵母细胞分别移入 EGF 浓度为 0(对照)、0.5、1、2.5、5 和 10ng/ml 的 Ham’s F10 培养液中进行体外培养,观察生殖泡破裂(GVBD)和第一极体(PB1)排出的情况。将达到 MⅡ期的卵母细胞进行体外受精,观察原核和胚胎发展情况。选择ⅠⅡ级 4 细胞胚胎植入假孕第 1 天小鼠的输卵管,观察产仔情况。 结果:hCG 刺激(G-PR)组和 hCG 未刺激(G-UPR)组的 GV 期卵丘-卵母细胞复合物(COC),在体外培养 12、16、20 和 24 小时 EGF浓度 1、2.5、5、10ng/ml 组 GVBD 发生率高于对照组(P<0.05,P<0.01);培养 20、24 和 36 小时 EGF 浓度 2.5、5 和 10ng/ml 组 PB1 排出率高于对照组(P<0.05,P<0.01),其中 EGF 浓度 5ng/ml 组的 GVBD、PB1 发生率最高(P<0.01)。G-UPR 组 GVBD 和 PB1 发生率的峰时间分别在2024 小时和 2436 小时;G-PR 组则分别发生在 1216 小时和 2024小时。两组 COC 在 1、2.5、5、10ng/ml EGF 浓度培养下的退化率分别低于对照组(P<0.05,P<0.01)。G-UPR 组和 G-PR 组卵母细胞的体外受精率、2 细胞和 4 细胞胚胎的发生率在 EGF 浓度为 5ng/ml 时明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.01)。两组胚胎植入母体均有外观正常的活仔产出。 结论:本研究显示 EGF 不仅可以促进 GV 期卵母细胞的成熟,对其受精能力和胚胎发展也有促进作用,而且可以抑制卵母细胞成熟过程中的凋亡、促进卵冠-丘颗粒细胞的扩展;EGF 的促进作用与剂量有关;使用促性腺激素加快了卵母细胞的体外成熟过程,同时也增加了卵母细胞的体外受精率。
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