酒花多酚的提取纯化及其降脂、抗氧化作用研究

论文摘要

植物多酚是植物体内的次级代谢产物,部分多酚类化合物兼有抗氧化和降血脂作用,越来越多的研究证实多酚类物质具有多种生物学活性,对人类的健康具有积极作用。啤酒花用于啤酒酿造中的主要有效成分是酒花树脂及酒花油。超临界CO2可以实现对这些成分的有效萃取,制备的啤酒花浸膏因质量稳定,易于储存和利用率高等特点在啤酒酿造中的使用量正在逐年增加,但是酒花中含量丰富的多酚类物质由于具有一定的极性,不能被超临界CO2萃取出来。酒花中的多酚类物质被保留在超临界CO2萃取后的萃余物中,而其萃余物基本上作为废弃物,未得到有效利用。因此,本文对超临界CO2萃取酒花后的萃余物中的多酚类物质进行了研究。以超临界CO2酒花萃余物为研究对象,对废酒花中的酒花多酚进行了提取和纯化,并对酒花多酚抗氧化和降血脂生物功效进行系统的研究,为降血脂和预防动脉粥样硬化提供新药来源,可为废酒花的再利用提供理论基础。主要研究内容及结果如下（1）超临界CO2萃取制备废酒花的工艺条件：CO2流量25 L/h,萃取压力25 MPa,萃取温度50℃,分离柱压为10 MPa,分离温度60℃,萃取时间1.5 h。此条件下,酒花中94%的多酚残留在酒花萃余物中,只有4%的多酚在酒花浸膏中（2）本实验中对超声波、热回流和恒温水浴振荡三种提取方式进行了对比,提取量大小关系为：超声波>热回流>恒温振荡,所以最终采用超声波辅助提取,其工艺条件为；料液比1：20,温度60℃,提取溶剂为50%乙醇,提取时间30 min,提取两次。此条件下,酒花多酚的提取量达到43.4 mg/g废酒花。（3）采用静态吸附与解吸试验对3种树脂（SP850、HP20、HP2GML）纯化多酚粗提液进行筛选。结果筛选出SP850树脂（吸附率和解析率分别为87.4%和78.4%）为最佳分离纯化酒花多酚的树脂。SP850树脂纯化酒花多酚的工艺条件为：上样多酚粗提液浓度为7.3 mg/mL,上样体积6 BV,吸附速率为3 BV/h,采用60%的乙醇洗脱,洗脱速率为2 BV/h,洗脱体积4 BV,水洗速率2BV/h,水洗体积为选择5 BV。此条件下制备的酒花多酚纯化物多酚含量可达75.1%。（4）测定了酒花多酚纯化物中总酚含量达75.1%,原花青素含量55.18%,鉴定出10种酚类成分,其中主要成分为芦丁和金丝桃苷,其含量分别为82.10 mg/g和78.10 mg/g,分别占总酚含量的10.89%和10.36%,其次表儿茶素、紫云英苷含量也比较高,占总酚含量分别为4.96%和3.51%,其余含量较低。（5）通过高脂血症模型小鼠体内试验得出,啤酒多酚可以降低高脂血症小鼠血清中TC、TG和LDL-C含量,升高HDL-C含量,还可以降低肝脏中TC和TG的含量,说明其具有降血脂和肝脂的功效。酒花多酚还可以提高小鼠血细胞SOD活力、全血GSH-Px活力、血清CAT活力和降低血清中MDA含量,以及提高肝脏中GSH-Px、SOD、CAT活力,降低MDA含量,说明其也具有体内抗氧化生物活性,可以作为预防AS的新药来源。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 植物多酚的研究现状
• 1.1.1 植物多酚简介
• 1.1.2 植物多酚的结构和分类
• 1.1.3 植物多酚的生理功能
• 1.1.4 植物多酚的提取和分离纯化方法
• 1.2 啤酒花概述
• 1.2.1 啤酒花简介
• 1.2.2 啤酒花的主要成分
• 1.3 本课题研究目的与研究内容
• 1.3.1 本课题研究目的与意义
• 1.3.2 本课题的研究内容
• 第二章 废酒花多酚的提取与纯化工艺研究
• 2.1 材料与仪器
• 2.1.1 实验材料
• 2.1.2 实验试剂
• 2.1.3 实验仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 酒花多酚的提取与纯化工艺流程
• 2萃余物（废酒花）的制备方法'>2.2.2 超临界CO₂萃余物（废酒花）的制备方法
• 2.2.3 酒花多酚的提取工艺的研究
• 2.2.4 酒花多酚的纯化工艺研究
• 2.2.5 酒花多酚含量的测定方法
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 酒花多酚测定标准曲线
• 2萃取制备废酒花'>2.3.2 超临界CO₂萃取制备废酒花
• 2.3.3 酒花多酚提取工艺研究结果
• 2.3.4 酒花多酚的纯化工艺研究结果
• 2.4 小结
• 第三章 酒花多酚对实验性高脂血症小鼠降脂、抗氧化作用的研究
• 3.1 材料与仪器
• 3.1.1 实验材料
• 3.1.2 实验动物
• 3.1.3 小鼠饲料
• 3.1.4 试剂
• 3.1.5 实验仪器
• 3.2 方法与步骤
• 3.2.1 动物饲养及处理
• 3.2.2 实验动物分组
• 3.2.3 样品的制备
• 3.2.4 肝匀浆蛋白质含量测定
• 3.2.5 小鼠饲养过程体重变化测定
• 3.2.6 小鼠体内血脂和肝脂指标测定
• 3.2.7 小鼠体内抗氧化指标测定
• 3.2.8 数据处理
• 3.3 实验结果
• 3.3.1 小鼠饲养期间体重变化
• 3.3.2 酒花多酚对实验型高血脂症小鼠血脂水平的影响
• 3.3.3 酒花多酚对实验型高血脂症小鼠肝脂水平的影响
• 3.3.4 酒花多酚对小鼠体内血清中抗氧化酶活力和MDA含量的影响
• 3.3.5 酒花多酚对小鼠肝脏中抗氧化酶活力和MDA含量的影响
• 3.4 小结
• 第四章 酒花多酚组分分析
• 4.1 材料与仪器
• 4.1.1 实验材料
• 4.1.2 实验试剂
• 4.1.3 实验仪器
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 多酚含量的测定
• 4.2.2 原花青素的测定
• 4.2.3 HPLC对酒花多酚组分的分析
• 4.3 实验结果
• 4.3.1 原花青素测定标准曲线
• 4.3.2 酒花多酚组分的HPLC测定结果
• 4.3.3 酒花多酚纯化物中各组分含量测定结果
• 4.4 小结
• 参考文献
• 攻读学位期间取得的研究成果
• 致谢
• 个人简况及联系方式