利用杆状病毒表达系统表达SARS-CoV和流感病毒的蛋白

利用杆状病毒表达系统表达SARS-CoV和流感病毒的蛋白

论文摘要

本论文,应用杆状病毒表达系统对SARS冠状病毒(SARS-CoV)和流感病毒的蛋白进行了高效表达。第一章介绍了各类表达系统,特别是杆状病毒表达系统,并对SARS-CoV和流感病毒进行了介绍。第二章利用AcMNPV Bac-to-Bac表达系统和一种带有信号肽基因和6个组氨酸(6×His)标签的转移载体pFastBacSHTa,表达了SARS-CoV WH20株的S,S1,S2,N,3a,M,7a,E共8个结构蛋白,得到了能够高效表达8个结构蛋白的重组病毒,Western blot分析表明所表达的蛋白具有良好的抗原性。纯化所表达的E蛋白制备了相应的多克隆抗体。第三章同样利用AcMNPV Bac-to-Bac表达系统和转移载体pFastBacSHTa表达了关于流感病毒的结构蛋白HA、NA、NP几个不同株来源的共计10种蛋白(分别记为X1、X2、X3、X4、H5、H7、H9、T1、T2、T3)。第四章介绍了AcMNPV表面展示系统的研究,通过在AcMNPV囊膜蛋白GP64的信号肽和成熟蛋白之间插入增强型绿色荧光蛋白(eGFP)和SARS-CoV WH20株的膜结构糖蛋白S,使它们与gp64融合表达,蛋白印迹反应表明可以检测到融合蛋白。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第1章 文献综述
  • 第2章 SARS-CoV 主要结构蛋白的表达研究
  • 1 材料与方法
  • 2.结果
  • 3 讨论
  • 小结
  • 第3章 流感病毒主要结构蛋白的表达研究
  • 1 材料与方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 小结
  • 第4章 AcMNPV 表面展示系统的研究
  • 1 材料和方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 小结
  • 第5章 总结
  • 参考文献
  • 附录
  • 已发表和撰写的论文
  • 致谢
  • 相关论文文献

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