论文摘要
胰腺癌的诊断迫切需要新的有效的肿瘤标记物。本研究的目的是评价MUC2基因甲基化对胰腺癌早期诊断意义,并建立一种可行的胰腺癌基因甲基化检测方法。用RT-PCR法检测MUC2 mRNA的表达;免疫组化法检测MUC2蛋白的表达情况;甲基化特异性PCR（MSP）+直接测序法检测MUC2基因启动子区发生甲基化的确切位点;采用甲基化限制性酶切（MspⅠ/HapⅡ）+PCR方法检测胰腺癌患者外周血及粪便标本中MUC2甲基化情况。结果发现人胰腺癌细胞株ASPC、CFPAC1、SW1990经去甲基化制剂5-Aza处理后MUC2重新表达;同样此3种胰腺癌细胞株经MSP测序明确该基因启动子区5’CpG岛的甲基化位点;在外周血标本组中,40例胰腺癌标本中16例甲基化（40.0%）,15例慢性胰腺炎中未发现甲基化,25例正常对照中1例甲基化（4.0%）。30例胰腺癌患者粪便标本MUC2基因甲基化率为36.7%;8例慢性胰腺炎为0%;20例正常对照者甲基化率为5.0%。10例胰腺癌患者外周血及粪便标本联合检测,4例发生MUC2基因高甲基化,甲基化率为40%;而5例慢性胰腺炎患者及12例正常对照者中,未出现两种标本均发生甲基化者。胰腺癌与慢性胰腺炎、正常对照之间的差异有显著性（P<0.01）。MUC2基因在胰腺癌时普遍存在启动子区高甲基化,并在胰腺癌的发生,发展中起着重要作用。用甲基化限制性酶切PCR法对外周血和粪便进行MUC2基因启动子区高甲基化的联合检测可望成为新的胰腺癌诊断方法。
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标签：胰腺癌论文; 甲基化论文; 免疫组织化学论文; 甲基化限制性酶切论文;