越橘离体培养倍性育种研究

论文摘要

本试验对越橘花药愈伤组织的诱导方法和适宜的生长条件进行细致的摸索和研究,试验以越橘六个品种的花药为试材进行离体培养体系的研究,着重研究了越橘花药离体培养中诱导愈伤组织脱分化过程中各因素对花药愈伤组织形成的影响作用以及花药愈伤组织再分化过程中增殖及分化的最佳培养基配方;同时也对秋水仙素诱导越橘组培苗茎段和已诱变植株倍性的纯化进行研究。其研究结果具体如下:1、在越橘花药愈伤组织脱分化过程中,环境条件对花药愈伤组织的形成起到重要作用,在研究光照对越橘花药愈伤组织形成中,黑暗条件下有助于越橘花药愈伤的产生,其花药愈伤组织诱导率可达53.33%;不同低温处理时间对越橘花药愈伤组织诱导的作用不是十分明显,其中不经过低温处理和进行4℃低温处理1天有利于越橘花药愈伤组织的诱导,其诱导率最高可达80.13%。而不同的取材时间对越橘花药愈伤组织的形成也有影响:花朵采集应在盛花期,越橘宜在其进入花期一周左右为最佳采集时期;采集花冠的长宽比为2:1的花朵为最佳试材。2、在越橘花药愈伤组织再分化过程中,对诱导激素的种类和配比进行进一步的研究,研究结果表明:WPM+6-BA0.5mg/L+2,4-D1.0 mg/L为最佳的培养基配方,其花药愈伤组织增殖量可达1.6567g;在越橘花药愈伤组织诱导过程中,2,4-D起着主导作用,在配以相同浓度不同的细胞分裂素后,其中CPPU对越橘花药愈伤组织的增殖量影响较大,但使用CPPU花药愈伤组织的长势状况不如6-BA和KT混合使用和6-BA单独使用的效果好。同时对培养基的pH值进行了研究,结果表明:pH值为5.50时对越橘花药愈伤组织的增殖有明显的作用,增殖量可达1.7885g;当pH值低于5.0时有利于愈伤组织的长势,愈伤组织结构致密。在越橘花药愈伤组织增殖的研究中,以WPM+CTK1.0mg/L+ IBA0.4mg/L和WPM+6-BA 0.5 mg/L+NAA0.25mg/L为最佳的增殖培养基配方,最有利于越橘花药愈伤组织的增殖与分化。3、利用秋水仙素对越橘两个品种进行诱导多倍体研究并进行倍性鉴定,结果表明:茎段培养:“北陆”经过秋水仙素浸渍法和药剂培养基法处理后,能诱导出嵌合体的变异植株,浸渍法最好的组合是浓度为2.0mg/L的条件下处理24h,变异率最高达到32.50%;药剂培养基法最好的处理方法是浓度为0.002%,变异率达到5%,对已诱变的“埃利奥特”同时也进行秋水仙素浸渍法和药剂培养基法处理,和“北陆”效果基本一致,也出现了四倍体变异细胞,但未见其他倍性细胞出现,可见加倍后的细胞可以通过多次继代消失。纯化:对已诱变的越橘苗进行继代鉴定并未发现倍性发生变异的植株,经过多次继代的嵌合体会发生层间取代,导致周缘嵌合体消失。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1.前言
• 1.1 越橘的营养保健作用及其发展前景
• 1.2 越橘组织培养研究概况
• 1.3 园艺植物花药培养研究概况
• 2.材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.2 实验设计
• 2.3 试验结果观测与数据统计分析方法
• 3.结果与分析
• 3.1 越橘花药愈伤组织诱导培养
• 3.2 越橘茎段诱导多倍体
• 3.3 已诱变越橘品种组培苗的倍性鉴定、筛选和纯化
• 4.讨论
• 4.1 越橘花药愈伤组织诱导
• 4.2 越橘组培苗诱导多倍体及纯化
• 5.结论
• 参考文献
• 附录1 图版
• 附录2 缩略词表
• 致谢