论文摘要
肌内脂肪与肌肉感观品质紧密相关,是肉质细嫩多汁和口感好的物质基础。猪肉品质的营养调控及其相关机制探讨是当前的研究热点之一。本研究通过三个试验考察了饲粮中不同能量水平对猪肌内脂肪含量及脂肪酸合成酶(FAS)、激素敏感脂肪酶(HSL)活性与基因表达的影响,以揭示能量与肉质的关系及其可能机制。试验一饲粮能量水平对猪生产性能、肉品质和血液指标的影响。本试验拟探讨饲粮能量水平对猪生产性能、脂肪沉积及血液脂质代谢的影响。试验采用单因子设计,将72头20kg左右的长白×荣昌杂交猪分成3个处理组,分别饲喂消化能为11.75MJ/kg(低能组)、13.05 MJ/kg(中能组)和14.36 MJ/kg(高能组)的饲粮。每组6个重复,每个重复4头猪,试验猪体重达100kg时结束试验。结果表明:(1)提高饲粮能量水平对猪的日增重和日采食量有提高趋势(P>0.05),并可明显改善饲料转化率(P<0.05)和显著缩短育肥时间(P<0.05)。(2)提高饲粮能量水平可增加背膘厚,提高外周脂肪和肌内脂肪含量(P<0.05),对其他肉质指标无显著影响。(3)随着能量水平提高,血清中甘油三酯和总胆固醇含量升高。与低能组相比,中能组和高能组的血清甘油三酯含量分别提高了14.8%(P>0.05)和37.0%(P<0.05),中能量组和高能量组之间差异不显著(P>0.05);血清总胆固醇的含量提高了4.8%(P>0.05)和15.0%(P<0.01),高能量组较中能量组提高了9.5%(P<0.05)。本结果表明,饲粮能量水平可以显著影响生长育肥猪生产性能、脂质代谢和胴体脂肪沉积量。试验二饲粮能量水平调控脂肪沉积机制的研究本试验拟通过考察不同组织FAS和HSL的活性及其基因表达来解释饲粮能量水平影响脂肪沉积的分子机制。试验设计同试验一。当试猪达到100kg体重时屠宰取样,测定FAS和HSL的活性及其基因表达。结果表明:(1)与低能组相比,中能组和高能组的脂肪组织中的FAS活性分别提高了19.4%(P>0.05)和41.9%(P<0.01);肝脏中的FAS活性提高了6.6%(P>0.05)和31.4%(P<0.01),并且中能组和高能组之间差异极显著(P<0.01);肌肉组织中的FAS活性提高了208.4%(P<0.01)和769.9%(P<0.01),并且中能组和高能组之间差异极显著(P<0.01)。对于相同能量水平的试验猪,其FAS活性具有组织差异性,脂肪组织中FAS活性最高,肝脏组织中的活性其次,肌肉组织中的活性最低。(2)随着能量水平提高,脂肪组织、肝脏组织和肌肉组织中的激素敏感脂肪酶活性具有降低的趋势,但各能量组之间未达显著差异(P>0.05)。对于相同能量水平的试验猪,其脂肪组织中激素敏感脂酶活性极显著高于肝脏与瘦肉组织中的活性(P<0.01)。(3)皮下脂肪和肌肉组织中FAS mRNA均随着饲粮能量水平的提高不同程度的提高。与低能组相比,中能组和高能组皮下脂肪中FAS mRNA表达量分别提高了13.9%(P>0.05)和42.3%(P<0.05),肌肉组织中FAS mRNA表达量分别提高了23.1%(P>0.05)和44.6%(P>0.05)。对于相同能量水平的试验猪,脂肪组织中FAS mRNA表达量均极显著高于肌肉组织(P<0.01)。(4)皮下脂肪和肌肉组织中HSL mRNA表达量均随着饲粮能量水平的提高不同程度的降低。与低能组相比,中能组和高能组的皮下脂肪中HSL基因表达量分别降低了15.7%(P<0.05)和23.8%(P<0.05),肌肉组织中HSL基因表达量分别降低了13.6%(P<0.05)和22.6%(P<0.05)。对于相同能量水平的试验猪,脂肪组织中HSL mRNA表达量均极显著地高于肌肉组织(P<0.01)。(5)脂肪组织和肌肉组织中FAS mRNA/HSL mRNA比值均随能量水平升高不同程度的提高。与低能组相比,中能组和高能组皮下脂肪中FAS mRNA/HSL mRNA比值提高了30%(P>0.05)和85%(P<0.05),背最长肌中FAS mRNA/HSL mRNA比值提高了46.2%(P>0.05)和88.5%(P<0.05)。(6)能量水平与肌内脂肪含量(P<0.05)、FAS mRNA表达量(P<0.05)以及FAS mRNA/HSL mRNA比值(P<0.05)之间呈显著正相关,与HSL mRNA表达量呈负相关(P<0.01)。试验三葡萄糖浓度对猪前体脂肪细胞生长及FAS和HSL基因表达量的影响本试验拟通过猪前体脂肪细胞的体外培养,以葡萄糖作为能量来源,研究能量水平对脂肪细胞FAS和HSL基因表达的直接作用。试验取18日龄长×荣公猪附睾处脂肪组织分离的前体脂肪细胞为研究材料,采用单因子试验设计,共设3个葡萄糖水平梯度,在培养基中添加的葡萄糖浓度分别为0、0.25%、0.5%,每个处理设6个重复,并在16h和32h时观察细胞生长情况,并且分别取3瓶细胞提取总RNA,测定FAS mRNA和HSLmRNA的表达量。研究结果表明:(1)在培养的16h和32h时,随着培养液中葡萄糖浓度的增加,细胞的生长情况越来越好。(2)随着葡萄糖浓度的增加,前体脂肪细胞中FASmRNA和HSL mRNA表达量均明显提高(P<0.05);在相同葡萄糖浓度下,随着培养时间的增加前体脂肪细胞中FAS mRNA和HSL mRNA的表达量略有降低(P>0.05)。由此可知,FAS mRNA和HSL mRNA表达量随葡萄糖浓度的增加或时间延长而相应增加或降低,能量水平直接影响该基因的表达量。本研究从体内和体外试验证明,饲粮能量水平显著影响生长育肥猪肌内脂肪含量,其机制与脂肪酸合成酶与激素敏感脂肪酶的活性及基因表达量的调节有关。