施氏鲟的性腺发育及人工性别控制研究

论文摘要

施氏鲟是黑龙江特有的经济鱼类，目前已成为重要的养殖品种。鲟鱼最有价值的产品是鱼子酱，随着养殖技术的提高和生产规模的扩大，通过人工养殖获得鲟鱼子酱已成必然趋势。对施氏鲟性腺发育和性别控制的研究，是解决鲟鱼养殖过程中人工繁育和全雌化生产的基础和必要手段。本文采用组织学、生物化学及放射免疫学等方法，对不同发育时期施氏鲟的性腺组织、外源性激素诱导后血液和组织中性类固醇激素、及雌性化比率进行观察和测定，同时也探讨了人工养殖条件下施氏鲟的雌雄比率。 人工养殖条件下，施氏鲟血液中睾酮（Testosterone，T）的含量随着年龄增长而增加，从1龄到4龄T含量是处于上升状态，到5龄时表现了下降趋势。雌二醇（17β-estradiol，E2）与T含量有所不同，在1龄时维持较低水平，到2龄时仍保持较低的水平，2～4龄E2水平缓慢上升，4～5龄E2水平快速上升。雌性亲鱼可达到904pmol1·L-1，雄性亲鱼的E2水平维持在较低的水平内。 施氏鲟性成熟晚，性腺发育时间较长，雌鱼成熟需9～11年，雄鱼则为6～7年，而人工养殖的雌鱼性成熟提前1～2年。鱼苗出膜12天，在其肾管区下方可见有一棒状突起，由上皮细胞构成，为生殖腺原基。至六月龄时性腺切片可见原始生殖细胞进行有丝分裂，分裂后发育为性原细胞，但在显微镜下无法判断其雌雄。七月龄后显微镜下可以看到不同性别性腺结构某些特征，组织学可以观察到明显卵巢结构和精巢结构。性腺二期是性腺中脂肪大量积累的阶段，同时也出现了大量的初级性母细胞，此阶段发育时间较长，可长至数年。性腺三期性腺增生较快，脂肪消耗的速度加快，性腺重量明显增加，横切面上性腺组织面积扩大。精巢外型展开为两端尖细的长梭形，淡红色、黄色或上有青色斑，由鳔前1／3处至泄殖腔前。卵巢中脂肪消耗较快，色素和脂肪集中于卵巢中、侧部，性腺组织上分散血管，性腺细胞贴附在脂肪上，脂肪裹着性腺组织，后者呈橘瓣状或指状交叉重叠。性腺四期雌雄性腺极易分辨，已接近生理成熟。精巢还残存着一些脂肪，上面分布大量血管使整个精巢呈粉红色，此时表面可见精子，输精管变粗，内已有少量的精子。卵巢体积很大且脂肪全部消失，剖开腹壁及可见到有透明薄膜包裹的大量的卵细胞，卵细胞长轴直径在2.5～4mm之间。性腺五期鱼体腹部胀大而松软，此时性腺达到生殖成熟。轻按腹部有泄殖孔流出乳白色的精液或黑褐色的卵。性腺六期为退化期，其内的发育成熟的性腺细胞被排出或自然吸收。卵巢体积因产卵而显著减小，颜色暗淡，松软萎缩，其内残留滤泡和第Ⅳ、Ⅴ时相的卵母细胞，它们很快被卵巢吸收退化，形成半透明、桔黄色的不规则结构。生殖后的精巢，体积缩小，外观萎瘪，经恢复后转为Ⅱ期。 通过电镜观察的施氏鲟卵巢中卵原细胞核常染色质较多，异染色质呈浅月牙形在核一侧，核膜完整。胞质中大量的腊肠状或蚕豆状的线粒体，在脂肪之间和血管附近弥散大量的梅花状的糖原，一些糖原趋近卵原细胞，并能看到糖原向胞核处运输。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 绪论
• 1.1 研究目的和意义
• 1.2 鲟鱼概述
• 1.2.1 鲟鱼的分类地位和种类
• 1.2.2 世界及我国鲟鱼资源状况
• 1.2.3 施氏鲟的形态及生态习性
• 1.3 鱼类生殖生理学的研究进展
• 1.3.1 鱼类的卵巢结构及卵子发育的研究进展
• 1.3.2 鱼类的精巢结构及精子发生的研究进展
• 1.3.3 鱼类性分化的研究现状
• 1.3.4 国内外鲟鱼生殖生理学的研究进展
• 2 材料与方法
• 2.1 施氏鲟不同年龄血清性类固醇激素的变化
• 2.1.1 实验材料
• 2.1.2 放射免疫测定方法
• 2.2 施氏鲟不同年龄性腺组织的发育
• 2.2.1 实验材料
• 2.2.2 实验试剂的配置
• 2.2.3 光镜材料固定和处理
• 2.2.4 光镜材料的H.E.染色法
• 2.2.5 电镜材料的固定和处理
• 2诱导施氏鲟全雌化实验'>2.3 口服E₂诱导施氏鲟全雌化实验
• 2.3.1 实验材料
• 2.3.2 饲料的配置
• 2.3.3 试验分组及投喂管理
• 2的测定方法'>2.4 全雌化后血清中E₂的测定方法
• 2.4.1 实验材料
• 2.4.2 实验试剂的配置
• 2.4.3 口服试验样品的测定
• 2.5 全雌化后血清中T的测定方法
• 2.5.1 标准曲线的制作
• 2.5.2 样品的测定
• 2残留的测定方法'>2.6 全雌化后组织中E₂残留的测定方法
• 2.6.1 实验材料
• 2.6.2 口服试验样品的测定
• 2.7 全雌化后的雌性率及性腺组织学观察
• 2.7.1 实验材料
• 2.7.2 实验试剂的配置
• 2.7.3 全雌化后雌性率的统计
• 2.8 人工养殖施氏鲟雌雄比的统计
• 2.9 本章小结
• 3 结果
• 2的浓度'>3.1 不同年龄施氏鲟血清中T和E₂的浓度
• 2的标准曲线'>3.1.1 E₂的标准曲线
• 3.1.2 T的标准曲线
• 2的浓度'>3.1.3 血清中T、E₂的浓度
• 2的浓度'>3.2 亲鱼血清中T、E₂的浓度
• 2的含量'>3.3 全雌化后血清中T、E₂的含量
• 2的标准曲线'>3.3.1 E₂的标准曲线
• 3.3.2 T的标准曲线
• 2的含量'>3.3.3 全雌后血清中E₂的含量
• 3.3.4 全雌后血清中T的含量
• 3.4 全雌化后组织中E2的残留
• 3.5 不同年龄施氏鲟性腺的组织学观察
• 3.5.1 性腺的组织0期的观察结果
• 3.5.2 性腺一期
• 3.5.3 性腺二期
• 3.5.4 性腺三期
• 3.5.5 性腺四期
• 3.5.6 性腺五期
• 3.5.7 性腺六期
• 3.6 早期性腺的超微结构
• 3.6.1 早期卵巢
• 3.6.2 早期精巢
• 3.7 诱导后施氏鲟雌性率的比较及性腺组织学观察结果
• 3.7.1 诱导后施氏鲟雌性率的比较
• 3.7.2 性腺组织学观察结果
• 3.8 本章小结
• 4 讨论
• 2的含量变化'>4.1 不同年龄施氏鲟血清中T和E₂的含量变化
• 2的浓度变化'>4.2 全雌化后血清中T与E₂的浓度变化
• 2在鱼体内的残留'>4.3 全雌化后E₂在鱼体内的残留
• 4.4 原生殖细胞的起源、迁移途径及早期性腺的构建
• 4.5 性腺分期、卵巢发育成熟时间与周期
• 4.6 生殖质的形成及性别决定
• 4.7 外源性激素对鱼类性别的诱导
• 结论
• 参考文献
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 致谢
• 个人简历