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四川地区宫颈癌患者组织中高危型人乳头瘤病毒的分子流行病学研究

2020-11-23阅读(87)

四川地区宫颈癌患者组织中高危型人乳头瘤病毒的分子流行病学研究

论文摘要

宫颈癌在妇女恶性肿瘤发生中居第二位,每年全球大约新增病例50万,我国近13万,占世界新增病例的28.8%。因此,宫颈癌仍然是世界性的公共卫生问题。自1973年科学家提出HPV感染和宫颈癌的相互关系,到1995年WHO和IARC将HPV正式确定为是宫颈癌的病因,此间大量的研究显示,HPV感染在不同的地区和人群中感染率及其感染亚型存在差异性。而HPV感染宫颈组织并不是都进展为浸润癌,它和HPV型别、型内基因突变及HPV基因组整合宿主基因组等因素密切相关。迄今为止,对型内基因突变以及HPV基因组的整合研究,从地理区域和人种上,还存在不足;而它是否影响宫颈癌的进展,也一直存有争议。所以,丰富的流行病学资料就显得很重要,不仅仅提供相关争议的论据,更为重要的是为宫颈癌预防和治疗性疫苗的设计提供有意义的信息。我国在HPV型内基因的突变以及HPV基因组整合的研究上非常有限,对HPV感染亚型的主要流行株则几乎没有报道。本论文将四川地区宫颈癌患者作为研究对像,从核酸水平上,调查了该地区9种高危HPV亚型的感染及其分布。结果显示,在该地区HPV感染主要以HPV16为主,其次是HPV58;并且除HPV35外都有感染病例。通过对HPV16 E6基因的突变分析,明确了该地区高危型HPV16感染以欧洲株及其欧洲变异体为主。我们重点分析了四川地区感染HPV高危亚型E6区的基因变异,和以前的研究比较,发现了许多新的变异。其中240位的C→G突变,正好位于某些抑癌基因如P53和免疫细胞的功能结合区。通过对HPV DNA整合的研究,我们的结果和国外的某些研究相反,在该组宫颈癌病例中,完全整合到宿主细胞基因组的HPV DNA,所占比例仅7%,相对较低。在临床上,尽管有人认为检测HPV物理状态可能作为一种肿瘤标志,而我们的结果也显示这种整合大多出现在高级别损伤中,但其应用意义,还应该深入研究。

论文目录

  • 第一章 前言
  • 一、宫颈癌（CC）与人乳头瘤病毒（HPV）的关系
  • 1. HPV 感染是宫颈癌的主要流行因素
  • 2. HPV 感染在宫颈癌疾病自然史中的作用
  • 二、宫颈癌流行病学综述
  • 1. 宫颈癌的发病率
  • 2. 感染途径
  • 3. 危险因素
  • 三、HPV 病毒概述
  • 1. 一般特征
  • 2. 基因组结构与功能
  • 3. 致病机理
  • 4. 检测分型
  • 四、宫颈癌的预防和治疗
  • 五、本论文的设计思想
  • 第二章 材料与方法
  • 第一部分 高危HPV 亚型在四川地区宫颈癌组织中的分布..
  • 一、实验材料
  • 二、实验方法
  • 1. 临床样品和资料信息的获取
  • 2. 组织DNA 提取
  • 3. 检测HPV 的PCR
  • 4. PCR 产物的回收纯化
  • 5. HPV 感染率测定与分型
  • 6. 核酸序列测定
  • 第二部分 HPV E6 基因碱基突变分析
  • 一、实验材料
  • 二、实验方法
  • 第三部分 HPV16 DNA 在宿主中存在状态的分析
  • 一、实验材料
  • 二、实验方法
  • 1+2+6 质粒构建'>1. pT-16E1+2+6质粒构建
  • 1+2+6 质粒E2/E6 比值的测定'>2. pT-16E1+2+6 质粒E2/E6 比值的测定
  • 3. HPV16E2 巢式PCR 的扩增
  • 4. HPV16E2 ORF 阳性样品E2/E6 比值的测定
  • 5. HPV DNA 在宿主基因组中存在状态的判定
  • 第三章 结果与讨论
  • 第一部分 高危HPV 亚型在四川地区宫颈癌组织中的分布..
  • 一、结果
  • 1. 临床样本信息
  • 2. 样品基因组提取
  • 3. HPV 总体感染率和亚型分布
  • 4. HPV 感染在各年龄组和FIGO 级别中的分布
  • 二、讨论
  • 三、小结
  • 第二部分 HPV E6 基因碱基突变分析
  • 一、结果
  • 1. HPV18 型E6 基因碱基突变分析
  • 2. HPV33 型E6 基因碱基突变分析
  • 3. HPV45 型E6 基因碱基突变分析
  • 4. HPV52 型E6 基因碱基突变分析
  • 5. HPV58 型E6 基因碱基突变分析
  • 6. HPV59 型E6 基因碱基突变分析
  • 7. HPV16 型E6 基因碱基突变分析
  • 二、讨论
  • 三、小结
  • 第三部分 HPV16 DNA 在宿主中存在状态的分析
  • 一、结果
  • 1+2+6 质粒的构建'>1. pT-E1+2+6质粒的构建
  • 1+2+6 质粒E2/E6 比值的测定'>2. pT-E1+2+6 质粒E2/E6 比值的测定
  • 3. HPV16 E2 ORF PCR 扩增结果
  • 4. HPV16 E2 巢式PCR 扩增结果
  • 5. HPV16 DNA 在宿主中状态的分析
  • 二、讨论
  • 三、小结
  • 参考文献
  • 致谢
  • 中文摘要
  • ABSTRACT
  • 作者简历

    • 相关论文文献

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