论文摘要
目的肿瘤耐药与凋亡通路的异常有关,PUMA是p53下游的凋亡调控因子。本实验研究以腺病毒做载体携带PUMA基因（Ad-PUMA）对绒癌耐药细胞ieg-3/vp16化疗敏感性的影响。方法应用MTT法检测Ad-PUMA单独以及与化疗药合用对绒癌亲本细胞jeg-3和其耐药细胞jeg-3/vp16增殖的影响,应用流式细胞术和分子生物学方法探讨其作用机制,并进行体内实验验证。结果5-Fu和Vp16诱导jeg-3细胞凋亡的过程中伴随PUMA表达增强,jeg-3/vp16与jeg-3相比,PUMA表达降低,而且对化疗药物反应减弱。Ad-PUMA促进细胞凋亡,抑制绒癌细胞增殖,增加化疗药物诱导绒癌细胞凋亡的能力,增加细胞对化疗药物的敏感性,尤其在jeg-3/vp16细胞,10MOIAd-PUMA与5-Fu,Vp16或MTX合用后,jeg-3/vp16对化疗药物的IC50分别下降了8.66,18.66和13.06倍。裸鼠皮下移植瘤实验发现,Ad-PUMA瘤内注射不但可以抑制绒癌jeg-3和jeg-3/vp16移植瘤生长,而且与Vp16合用后抑瘤效果显著增强,尤其在对单独应用Vp16不敏感的耐药肿瘤,Ad-PUMA与Vp16合用的抑瘤效果可以达到与在化疗敏感的亲本肿瘤相似的效果。结论PUMA在化疗药物诱导细胞凋亡的过程中发挥作用,其表达与细胞对化疗药物的敏感性有关。Ad-PUMA不仅诱导jeg-3和jeg-3/vp16凋亡,与化疗药物合用后,还显著增加绒癌细胞对化疗药物的敏感性,尤其对耐药绒癌细胞其化疗增敏作用更明显。