养殖大菱鲆爱德华氏菌病及其几种重要疾病的病理学研究

论文摘要

目前，大菱鲆工厂化养殖在我国北方沿海得到快速发展，短短几年内形成我国海水养殖的一个重要产业，取得了巨大的经济和社会效益。然而，养殖大菱鲆疾病的频繁发生，使这一产业的发展受到了严重阻碍，造成了严重的经济损失。为了保障大菱鲆养殖业能够健康、持续、稳定的发展，加强疾病的基础理论和防治技术研究是十分必要的。本论文以我国北方养殖大菱鲆的几种主要疾病为研究对象对其开展相关研究，以期为大菱鲆疾病的防治提供理论依据和参考。 本论文主要分为两大部分，分别为养殖大菱鲆爱德华氏菌病的研究和几种重要疾病的病理学分析。 大菱鲆爱德华氏菌病的研究：先后对3起养殖大菱鲆爱德华氏菌感染病例进行了发病情况、病原分离鉴定以及组织病理学等方面的研究。研究结果发现，大菱鲆爱德华氏菌病具有急性和慢性两种感染形式，两者呈现出不同的临床外观症状。急性感染的大菱鲆鱼体充血发红，随着病情的发展在鳍基部或腹部出现出血点或出血斑。严重感染者出血处病灶形成皮下脓肿；慢性感染的大菱鲆典型特征则是身体后半部体色明显变黑，形成明显的‘两截’现象。患病大菱鲆的肾脏病变最为显著。轻者，肾脏表面出现数个灰白色的黍粒状结节；病变较重的，整个肾脏发生膨大并呈脓疡性坏死；病变晚期的肾脏质地变硬似豆腐渣样。 对患病大菱鲆进行了细菌分离，根据分离株的形态、生理生化特性，并结合16S rDNA序列分析，将其鉴定为迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)。人工感染实验证实该菌为大菱鲆爱德华氏菌病的致病菌。 在光镜和电镜下研究了迟钝爱德华氏菌感染的大菱鲆的病理学特征。结果表明，组织局灶性坏死、巨噬细胞增生以及肉芽肿的形成是该病的主要病变特点，其中以单核巨噬细胞系统增生最为显著。该病的病变规律为：在疾病早期或环境菌量多、毒力强时，机体以变质性和渗出性炎症为主，表现为实质组织细胞的变性、坏死以及纤维素性炎性渗出。随后出现以巨噬细胞增生为主的炎症应答反应，最后大量增生的巨噬细胞吞噬细菌后转化成上皮样细胞聚集形成肉芽肿结构。迟

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 引言
• 一. 国外养殖大菱鲆的感染性疾病
• 二. 国内养殖大菱鲆的感染性疾病
• 三. 本研究的目的及其意义
• 参考文献
• 第一章 养殖大菱鲆爱德华氏菌病的研究
• 1 大菱鲆爱德华氏菌病的发现及其病原的初步确定
• 1.1 材料和方法
• 1.1.1 现场调查取样
• 1.1.2 实验室病鱼检查
• 1.1.3 病原菌的分离
• 1.1.4 人工感染实验及其致病原确认
• 1.2 结果
• 1.2.1 患病大菱鲆的临床表现
• 1.2.2 病灶组织的水浸片检查及肾脏涂片的观察结果
• 1.2.3 病原菌的分离培养结果
• 1.2.4 人工感染结果及其致病原确认
• 1.3 讨论
• 2 病原菌的鉴定
• 2.1 材料和方法
• 2.1.1 形态学观察
• 2.1.2 生理生化测定
• 2.1.3 API自动鉴定系统进行病原菌的鉴定
• 2.1.4 病原菌的16S rDNA序列分析
• 2.1.4.1细菌DNA的制备
• 2.1.4.2 PCR法扩增细菌的16S rDNA基因
• 2.1.4.3三株细菌的16SrDNA基因序列以及三者的同源性分析
• 2.1.4.4 QL-S菌株16S rDNA基因序列系统发育树的构建
• 2.1.4.5 药物敏感实验
• 2.2 结果
• 2.2.1 形态学观察结果
• 2.2.2 生理生化测试结果
• 2.2.3 API系统鉴定结果
• 2.2.4 16S rDNA序列及其序列同源性的比较
• 2.2.5 16S rDNA序列系统发育树的构建
• 2.2.6 药物敏感性实验结果
• 2.3 讨论
• 3 大菱鲆爱德华氏菌病的病理学研究
• 3.1 材料和方法
• 3.1.1 病鱼样品
• 3.1.2 石蜡切片的制备与观察
• 3.1.3 电镜切片的制备与观察
• 3.2 结果
• 3.2.1 病鱼的组织病理观察
• 3.2.2 病鱼的超微病理观察
• 3.3 讨论
• 4 迟钝爱德华氏菌的生物学特性及其对大菱鲆入侵途径的研究
• 4.1 材料和方法
• 4.1.1 不同温度培养条件对迟钝爱德华氏菌生长的影响
• 4.1.2 不同盐度培养条件对迟钝爱德华氏菌株生长及形态的影响
• 4.1.3 三株菌株的溶血性分析
• 50)的确定以及对大菱鲆入侵途径的研究'>4.1.4 迟钝爱德华氏菌对大菱鲆半致死浓度(LDS₅₀)的确定以及对大菱鲆入侵途径的研究
• 4.2 结果
• 4.2.1 菌株QL-S的温度生长曲线
• 4.2.2 不同盐度条件菌株QL-S的生长状况
• 4.2.3 三株迟钝爱德华氏菌株在体外的溶血性分析
• 4.2.4 菌株QL-S的人工感染试验
• 4.3 讨论
• 5 大菱鲆爱德华氏菌病的流行情况调查
• 5.1 材料和方法
• 5.1.1 定点调查和样品采集
• 5.1.2 大菱鲆迟钝爱德华氏菌病的确诊
• 5.1.3 十家养殖场的大菱鲆迟钝爱德华氏菌病调查
• 5.2 结果和讨论
• 5.2.1 大菱鲆迟钝爱德华氏菌病的确诊
• 5.2.2 对十家患病大菱鲆养殖场进行的调查结果
• 参考文献
• 第二章 养殖大菱鲆几种重要疾病的病理学研究
• 1. 大菱鲆病毒性“红体病”的病理学研究
• 1.1 材料与方法
• 1.1.1 材料来源
• 1.1.2 研究方法
• 1.2 研究结果
• 1.2.1 组织病理学研究结果
• 1.2.2 超微病理学研究结果
• 1.3 讨论
• 参考文献
• 2 蟹栖异阿脑虫寄生大菱鲆及其组织病理学研究
• 2.1 材料和方法
• 2.1.1 病鱼样品
• 2.1.2 病鱼检查
• 2.1.3 病原鉴定
• 2.1.4 组织制片
• 2.2 结果
• 2.2.1 病鱼的临床症状及水浸片检查结果
• 2.2.2 病原分类地位的确定
• 2.2.3 蟹栖异阿脑虫在苗期幼鱼体内的寄生及其组织病理学变化
• 2.2.4 蟹栖异阿脑虫寄生成鱼及其所引起宿主的组织病理学变化
• 2.3 讨论
• 参考文献
• 3 大菱鲆“凸眼病”的组织病理学研究
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料来源
• 3.1.2 研究方法
• 3.2 结果
• 3.2.1 病鱼的临床症状
• 3.2.2 病鱼的组织病理学变化
• 3.3 讨论
• 参考文献
• 4 大菱鲆“皮疣病”的病理学研究
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 材料来源
• 4.1.2 研究方法
• 4.2 研究结果
• 4.2.1 病鱼的临床症状
• 4.2.2 病理学研究
• 4.3 讨论
• 参考文献
• 总结
• 致谢
• 发表论文