论文摘要
目的:糖尿病(DM)是常见的慢性病之一,其慢性并发症可累及全身各组织器官,降低患者的生存质量并加重其经济负担。传统的治疗方法主要为严格的控制血糖和对症处理并发症,并不能阻止慢性并发症的进展。近年来的研究发现,免疫和炎症机制在DM及慢性并发症的发病过程中起着非常重要的作用。人工虫草在临床应用中可用于免疫调节治疗,本实验通过观察人工虫草对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠骨骼肌组织形态学变化、炎症因子TNF-α、MCP-1、IL-6的表达及免疫球蛋白的沉积的情况,研究免疫和炎症在相应器官病变中所起的作用,从免疫角度探讨DM的发病机制,并观察吡格列酮和人工虫草对糖尿病大鼠骨骼肌的保护作用,为DM及其并发症的防治提供理论依据。方法:90只雄性SD大鼠,随机抽取10只作为正常对照组,其余大鼠均由STZ造模,成模后进行随机分组,随机分为小剂量人工虫草组0.6g/kg·d、中剂量人工虫草组2.5g/kg·d、大剂量人工虫草组5.0g/kg·d、吡格列酮(PIO)组4mg/kg·d、糖尿病未治疗组,于第10周全部处死动物,实验期间留取血、尿标本分别检测肾功能、血脂和尿微量白蛋白。留取骨髂肌作为标本,作HE、MASSON、PTAH染色光镜观察病理变化,免疫荧光检测IgG的沉积情况,免疫组化观察骨骼肌TNF-α、MCP-1、IL-6的表达的变化。结果:STZ以45mg/kg的剂量静脉注射后,检测大鼠随机血糖大于16.7mmol/L,确定造模成功,结果显示各DM组大鼠随机血糖值均显著高于正常组(P<0.05),且组问无明显差异(P>0.05),PIO和人工虫草各治疗组生化指标均低于DM组(P<0.05),但治疗组大鼠组间各生化指标无明显差异(P>0.05)。未干预的DM大鼠出现骨骼肌炎细胞浸润、普遍性萎缩、明显的纤维化,各治疗组大鼠骨骼肌病理变化均有不同程度减轻,DM大鼠骨骼肌IgG沉积明显,各治疗组明显减少,各干预组TNF-α、MCP-1、IL-6表达明显减少。结论:STZ诱导DM大鼠存在多器官的免疫损伤,骨骼肌出现免疫球蛋白的异常沉积,提示在DM慢性并发症的发生和发展过程中,免疫反应可能起到了关键的作用。应用人工虫草和PIO进行免疫调节或免疫抑制治疗能有效减轻骨骼肌病变的程度,并减少骨骼肌中免疫球蛋白的沉积量,提示在临床上早期给予免疫调节或免疫抑制治疗可能会预防或延缓糖尿病骨骼肌病变的发生。糖尿病骨骼肌病变时,大鼠骨骼肌TNF-α、MCP-1、IL-6的蛋白表达增加,共同促进了糖尿病骨骼肌病变的发生和发展,人工虫草和PIO治疗能抑制DM大鼠骨骼肌TNF-α、MCP-1、IL-6蛋白的表达,可能的机制是通过减少各损伤器官的Ig的沉积和抑制炎症相关的细胞因子TNF-α、MCP-1、IL-6在各器官的表达,从而抑制了各器官的免疫炎症反应。
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