论文摘要
目的 本研究在建立人巨细胞病毒（human cytomegalovirus, HCMV）先天性潜伏感染老年小鼠模型的基础上,重点观察了HCMV先天性潜伏感染引起小鼠大脑皮质AD样病理改变,探求HCMV先天性潜伏感染在AD发生中的可能作用,为AD病因学研究及发生机制提供新的思路和合适的动物模型。 方法 从确定为HCMV先天性潜伏感染的小鼠及DMEM组小鼠中随机各取6只,分别按照实验设计处死小鼠,无菌取小鼠大脑组织。一部分用多聚甲醛固定,常规制作石蜡切片。一部分用戊二醛固定,制作电镜标本。其余脑组织做体外共培养激活实验。取石蜡切片用于以下试验:（1）HE染色检测小鼠脑组织构筑、病理改变和生物学特性;（2）刚果红染色检测脑组织中的淀粉样斑块;（3）镀银染色检查脑组织中的神经原纤维缠结和淀粉样斑块;（4）间接免疫荧光检测脑组织中的磷酸化Tau蛋白;（5）透射电镜观察小鼠大脑神经元超微结构改变;（6）体外共培养激活实验观察:①HCMV特征性CPE ②PCR和RT-PCR分别检测HCMV IE DNA和UL83 DNA及其相应mRNA表达③间接免疫荧光检测细胞爬片中的HCMV IE和pp65蛋白 ④透射电镜观察细胞爬片中的疱疹样病毒颗粒:（7）对大脑皮层的神经元数目、神经原纤维缠结数和突触数密度进行计数。 结果 HE染色发现病毒感染组小鼠大脑皮质神经元着色较浅,数目明显减少,神经元发生退行性病变;尤其是海马区神经细胞脱失,数目减少,胞质疏松,细胞层数减少。刚果红染色发现病毒感染组小鼠大脑皮质中有淀粉样斑块。镀银染色发现小鼠大脑皮质中有神经原纤维缠结和淀粉样斑块。间接免疫荧光检测发现病毒感染组小鼠大脑皮质中有磷酸化Tau蛋白沉积,呈团块状分布。透射电镜发现在小鼠大脑皮质神经元超微结构出现明显病理改变,虽未找到疱疹样病毒颗粒,但在核内发现双股螺旋细丝、膜性环状物和长线形丝状物。体外共培养激活后,
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