人内皮抑素基因的克隆、重组表达、纯化和活性研究

论文摘要

研究背景 子宫内膜异位症（Endometriosis,简称内异症）是一种育龄妇女的常见病,发病率逐年上升,已达10%-15%,35%-50%的不孕妇女患有该病,由其引起的痛经、不孕、性交疼痛等症状严重影响着妇女的生活质量。内异症真正的病因和发病机制尚不明确。现有的治疗方法局限于激素类药物、手术或手术联合药物等,虽对缓解症状,提高妊娠率有一定帮助,但疗效有限,副作用大,复发率高。近年来的研究表明,脱落的子宫内膜附着在腹膜或其它部位时,异位内膜本身及其周围组织新的血供的建立和维持,是异位内膜种植存活和子宫内膜异位症发生的基本条件。血管生成机制已成为内异症公认的重要发病机制之一。因此,从血管生成理论出发,寻找内异症新的治疗途径,降低内异症复发和减少毒副作用已成为临床的迫切需要。内皮抑素作为目前已知最强的内源性血管形成抑制因子,在肿瘤的治疗方面已有大量研究及应用,但在内异症的治疗研究领域鲜有报道。目的 本研究旨在通过分子生物学技术,从胎肝组织克隆人内皮抑素基因,在大肠杆菌中表达,纯化后得到有生物学活性的重组蛋白质产物,为后续的动物实验奠定基础。 方法与结果 1.采用RT-PCR技术从胎肝中克隆人内皮抑素基因全序列,构建人内皮抑素

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 第一章 人内皮抑素基因的克隆及序列测定
• 1.1 材料与方法
• 1.1.1 材料
• 1.1.2 方法
• 1.2 结果
• 1.3 讨论
• 1.4 小结
• 第二章 pBV220-Human Endostatin非融合表达载体的构建、表达和纯化
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 方法
• 2.2 结果
• 2.3 讨论
• 2.4 小结
• 第三章 pTRX-Human Endostatin融合表达载体的构建、表达和纯化
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 方法
• 3.2 结果与分析
• 3.3 讨论
• 3.4 小结
• 第四章 重组蛋白Human Endostatin的活性研究
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 材料
• 4.1.2 方法
• 4.2 结果与分析
• 4.3 讨论
• 4.4 小结
• 总结与展望
• 参考文献
• 附录
• 攻读学位期间成果
• 致谢
• 原创性声明及版权使用授权说明