论文摘要
目的:旨在探讨随绝经过渡期进展,大鼠卵巢卵泡发育、闭锁、颗粒细胞凋亡趋势,以及凋亡相关基因Bax、Bcl-2蛋白表达产物、Inh-α亚单位表达随绝经过渡期进展变化趋势。 方法:1、通过阴道脱落细胞涂片方法,选择阴道脱落细胞无发情期改变的10、12、14、16、18月龄Wister雌性大鼠,每组8只作为研究对象。2、石蜡切片HE染色,观察不同月龄大鼠卵巢卵泡发育,卵泡闭锁形态学特点。3、透射电镜观察卵泡颗粒细胞的超微结构变化。4、免疫组化染色了解Bax蛋白、Bcl-2蛋白及Inh-α亚单位在卵巢颗粒细胞中表达的变化情况。 结果:1、光镜下病理学观察10月龄的大鼠卵巢皮质可见相对较多的初级卵泡、次级卵泡,以及闭锁卵泡,黄体。随大鼠月龄的增长,生长卵泡渐少,黄体数量少,而见较多的闭锁卵泡。以致后期大鼠卵巢皮质萎缩,几乎无卵泡发育。2、电镜下超微结构观察:正常颗粒细胞的核仁明显,常染色质和异染色质分布均匀,常染色质含量丰富,核膜完整光滑。胞质中含有较多的线粒体、粗面内质网以及高尔基体等细胞器。在凋亡早期的颗粒细胞中细胞器出现水肿,空泡样变,线粒体肿胀、嵴断裂、絮状变甚至消失,继而染色质向核边缘凝集,核膜皱缩,,到了凋亡中期,染色质进一步凝集边缘化,,以至于凋亡后期颗粒细胞核深染,细胞结合松散,部分脱落,细胞碎裂后形成凋亡小体。3免疫组化:大鼠卵巢颗粒细胞都有Bax蛋白、Bcl-2蛋白、Inh-α亚单位的表达,Bax蛋白、Bcl-2蛋白主要表达于细胞的核膜、胞浆,Inh-α亚单位主要表达于胞浆。其中Bax蛋白表达结果:总的来说有差异,各组间两两比较,除10月组与12月组,12月组与14月组P>0.05,余都P<0.05。凋亡抑制基因Bcl-2蛋白表达:总的来说有差异,除12月组与14、16月组,14月组与16、18月组,16月组与18月组比较P>0.05,余都P<0.05。各组大鼠Inh-α亚单位表达结果:总的来说有差异,除16月组18月组P=0.13,余都<0.01.各指标间相关分析:Bax蛋白与Bcl-2蛋白P<0.05,R=-0.331:Inh-α亚单位与Bax蛋白P<0.05,R=+0.372:Inh-α亚单位与Bcl-2
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