双嘧达莫预处理对大鼠原位肝移植缺血再灌注损伤的保护作用

论文摘要

肝移植历经40 余年的发展,目前已成为治疗终末期肝病的根本手段。肝移植术后的原发性无功能已被报道是早期移植失败的最普遍原因,约占这种移植失败的36%。而肝移植的缺血再灌注损伤被认为是导致肝移植术后原发性无功能的重要原因。目前对于肝脏缺血再灌注损伤的防治尚未找到确实有效的方法。近年来,缺血预处理作为一种内源性保护措施受到医学领域的关注,它能够有效地减轻缺血再灌注损伤。这种保护效应在心、脑、骨骼肌、肝脏等脏器中均得到了证实,同时证明腺苷是预处理效应产生的关键因素。双嘧达莫（DP）,曾为心、脑血管系统的常用药物,作为一种腺苷转运抑制剂,能够有效地增加细胞外内源性腺苷的浓度,目前对缺血再灌注损伤的保护作用已受到越来越多的重视。本实验采用同基因Wistar 大鼠建立二套袖法原位肝移植模型,将80 只大鼠随机分为四组:A 组（对照组,10×2）,术前1 h 静推2 ml 生理盐水;B、C、D 组（DP 预处理组,每组10×2）,术前1 h 分别按0.2 mg/kg、0.3 mg/kg、0.4 mg/kg 双嘧达莫计算,静推其稀释液2 ml。检测指标:①检测移植前及门静脉恢复血流后6 h 血清肝脏酶学指标;②检测肝移植前、门静脉复流后1 h 及6 h 肝组织一氧化氮（NO）、髓过氧化物酶（MPO）、钠-钾ATP 酶及钙ATP 酶水平;③对移植前及门静脉复流后6 h 的肝脏组织进行病理学分析。检测结果数据采用统计软件SPSS 进行处理。结果发现:C、D 两组大鼠术后6 h 血清ALT、AST 水平明显低于对照组、术后1 h 及6 h肝组织NO 水平高于对照组、MPO 水平低于对照组、钠-钾ATP 酶及钙ATP酶水平均不同程度高于对照组,其差异多具有统计学意义。C 组与D 组之间亦多存在显著性差别,C 组效果更为明显。术后肝脏病理组织学B、C、D 组改变均较对照组明显减轻,以C 组最轻。说明双嘧达莫能明显保护大鼠肝移植的缺血再灌注损伤,同时对于大鼠0.3 mg/kgDP 考虑为最佳剂量。

论文目录

• 论文中所用英文简写及略称
• 前言
• 第一章 文献综述
• 1. 双嘧达莫的药理作用及机制
• 2. 肝移植中缺血再灌注损伤的发生机制
• 2.1 氧自由基
• 2.2 钙超载
• 2.3 Kupffer 细胞的激活及中性粒细胞的聚集
• 2.4 细胞因子
• 2.5 内皮素和一氧化氮浓度的失衡
• 2.6 微循环功障碍
• 2.7 细胞凋亡
• 3. 双嘧达莫保护肝脏缺血再灌注损伤的机制
• 3.1 双嘧达莫通过腺苷途径保护肝脏缺血再灌注损伤的机制
• 3.1.1 诱导一氧化氮的产生
• 3.1.2 抑制Kupffer 细胞的活化
• 3.1.3 减轻中性粒细胞的聚集程度
• 3.1.4 抑制过氧化物阴离子的产生
• 3.1.5 其它
• 3.2 双嘧达莫通过其它途径保护肝脏缺血再灌注损伤的机制
• 3.2.1 保持能量代谢
• 3.2.2 抗氧化作用
• 3.2.3 改善微循环紊乱
• 3.2.4 抑制血小板聚集
• 3.2.5 部分抑制肝脏组织中性粒细胞的浸润
• 4. 展望
• 第二章 材料与方法
• 1 实验动物及分组
• 1.1 实验动物情况
• 1.2 实验动物的分组及处理
• 2 实验方法
• 2.1 大鼠原位肝移植模型的建立
• 2.1.1 实验动物准备
• 2.1.2 供体手术
• 2.1.3 修肝和血管套袖准备
• 2.1.4 受体手术
• 2.2 肝移植干预组模型制作
• 3 标本的采取和测定
• 3.1 标本的采取
• 3.2 检测指标及其方法
• 3.2.1 一般情况
• 3.2.2 血清肝功能测定
• 3.2.3 肝组织病理学分析
• 3.2.4 硝酸还原酶法测定肝组织中一氧化氮（NO）含量
• 3.2.5 测定肝组织中髓过氧化物酶（MPO）含量
• 3.2.6 测定肝组织中ATP 酶活力
• 4 主要仪器
• 5 主要试剂
• 6 统计学处理
• 第三章 实验结果
• 1 一般情况
• 2 各组手术时间及无肝期比较
• 3 各实验组移植前后血清ALT 和AST 水平的变化
• 4 各实验组移植前后肝组织中NO 水平变化
• 5 各实验组移植前后肝组织中MPO 水平的变化
• 2+-ATP 酶及Na⁺-K⁺-ATP 酶水平变化..'>6 各实验组移植前后肝组织中Ca²⁺-ATP 酶及Na⁺-K⁺-ATP 酶水平变化..
• 7 肝脏组织病理学变化
• 第四章 讨论
• 1 肝移植前后血清AST、ALT和肝组织病理学改变及DP对其影响
• 2 肝移植各时相NO 水平的改变及DP 对其影响
• 3 肝移植各时相肝组织MPO 水平的改变及DP 对其影响
• +-K⁺-ATP 酶、Ca²⁺-ATP 酶的变化及DP对其影响'>4 肝移植各时相肝组织Na⁺-K⁺-ATP 酶、Ca²⁺-ATP 酶的变化及DP对其影响
• 5 本实验研究的存在的问题及进一步研究设想
• 5.1 存在的问题
• 5.2 进一步研究设想
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 中文摘要
• 英文摘要
• 致谢
• 导师及作者简介