论文摘要
本研究在E. cloacae Z0206菌株发酵培养基筛选及发酵条件优化的基础上,制备了E. cloacae Z0206蛋白多糖；利用现代化分离纯化技术,得到了E.cloacaeZ0206多糖及其主要成分,并对其结构进行分析；以大鼠为研究对象,探讨E.cloacae Z0206蛋白多糖对动物生长、免疫和抗氧化功能的影响。试验选取50只体重为100±5g的Sprague-Dawley （SD）大鼠,随机分为5个处理组,每组10只,分别为空白对照组、E. cloacae Z0206多糖（PS）0.4%组、E. cloacae Z0206蛋白多糖（PPS）0.2%组、E. cloacae Z0206蛋白多糖（PPS）0.4%组和E. cloacae Z0206蛋白多糖（PPS）0.8%组。试验基础日粮参照实验动物日粮配方AIN-93G配制。预试期5天,正试期28天。试验结束后,测定大鼠生长性能指标、免疫功能指标和抗氧化功能指标。主要研究结果如下：1.E. cloacae Z0206蛋白多糖发酵培养基筛选及发酵条件优化本试验中,马铃薯汁培养基是E. cloacae Z0206菌株发酵产糖的最佳培养基类型,E. cloacae Z0206菌株在酵母膏0.2%、蛋白胨0.2%、蔗糖1.5%的马铃薯汁培养基中,初始pH 7.0,接种量3环和30℃的发酵条件下,产糖量最高。2.E. cloacae Z0206蛋白多糖中多糖主要成分的结构分析本研究中,E. cloacae Z0206蛋白多糖经过脱蛋白、离子交换层析、分子筛层析、紫外光谱、高效液相凝胶色谱、高效液相色谱、红外光谱等分析,表明该多糖主要成分由葡萄糖、半乳糖和甘露糖组成,摩尔比分别为6.860：0.455：1.180,平均分子量为23 982 Da,包含α和β两种糖苷键,存在吡喃糖环构型。3.E. cloacae Z0206蛋白多糖对大鼠生长性能的影响本研究结果表明,E. cloacae Z0206蛋白多糖和多糖有提高大鼠生长性能的趋势和提高大鼠肠道消化酶活力的功能。在生长性能方面,与对照组相比,添加0.2%的E. cloacae Z0206蛋白多糖（PPS）显著提高了大鼠体增重37.6%（p＜0.05）,而分别添加0.4%的E. cloacae Z0206多糖（PS）、0.4%的E. cloacaeZ0206蛋白多糖（PPS）和0.8%的E. cloacae Z0206蛋白多糖（PPS）有提高大鼠日增重的趋势,但统计差异不显著。在肠道消化酶活力方面,与对照组相比,添加PPS和PS,均显著提高了大鼠肠道淀粉酶和脂肪酶活力（p＜0.05）,其中PPS0.4%组效果最好。4.E. cloacae Z0206蛋白多糖对大鼠免疫功能的影响本研究结果表明,E. cloacae Z0206蛋白多糖和多糖有提高大鼠免疫功能的作用。与对照组相比,添加0.4%和0.8%的PPS显著提高了大鼠脾脏和胸腺指数（P＜0.05）。与对照组相比,PPS 0.2%组大鼠外周血T、B淋巴细胞转化率,脾脏T、B淋巴细胞转化率分别提高了20.0%（p＜0.01）、22.8%（P＜0.01）、7.1%（p＜0.01）和9.9%（p＜0.01）；PPS 0.4%组大鼠外周血T、B淋巴细胞转化率,脾脏T、B淋巴细胞转化率分别提高了33.0%（p＜0.01）、34.1%（P＜0.01）、20.1%（p＜0.01）和11.1%（p＜0.01）。与对照组相比,添加0.4%的PS,0.2%、0.4%和0.8%的PPS,均显著提高了大鼠血清补体C3水平（p＜0.05）、血清IL-6水平（p＜0.05）、TNF-a水平（P＜0.01）和血清溶菌酶活力（P＜0.01）。与对照组相比,PPS 0.2%组大鼠血清IgG和IgM水平分别提高了69.6%（p＜0.01）、1.6%（P＞0.05）和6.0%（p＜0.05）；PPS 0.4%组大鼠血清IgA、IgG和IgM水平分别提高了95.0%（p＜0.01）、8.1%（p＜0.05）和10.6%（p＜0.05）。结果表明,从总体上讲,PPS能显著提高大鼠非特异性免疫水平。5.E. cloacae Z0206蛋白多糖对大鼠抗氧化功能的影响本研究结果表明,E. cloacae Z0206蛋白多糖和多糖均能提高大鼠抗氧化功能。与对照组相比,添加0.4%的PS,0.2%、0.4%和0.8%的PPS,均显著提高大鼠肝脏SOD活力（p＜0.01）和GSH-Px活力（p＜0.05）；分别降低大鼠肝脏MDA含量18.9%（p＞0.05）、23.0%（p＜0.05）、28.4%（p＜0.05）和28.4%（p＜0.05）。结果提示,添加PPS和PS能提高大鼠抗氧化功能,其中PPS效果优于PS。