马尾松树皮提取物中萜类化合物的研究

论文摘要

本论文主要研究了马尾松树皮中的萜类成分，可分为三部分：首先，通过结合使用有机溶剂的浸提法和水蒸汽蒸馏法，并采用GC／MS联用法研究了马尾松树皮中的挥发性的萜类成分，并且通过单因素实验研究，得到了其最佳提取工艺参数。然后，通过溶剂萃取并结合后续处理，得到了马尾松树皮中的萜类提取物，并分别采用单因素实验和正交实验确定了溶剂提取法提取马尾松树皮中萜类成分的最佳提取工艺条件。最后，通过抑菌实验研究了马尾松树皮中的挥发性成分和提取的萜类成分的抗菌活性。主要实验成果如下：通过GC／MS方法对马尾松树皮挥发油进行了定性定量分析，鉴定出72个峰，确认了其中29种成分，采用峰面积归一法进行定量分析，所鉴定的组分占总峰面积的73.91％。其中的主要成分为庚烷（Heptane）（6.36％）、1-甲基-环己烷（Cyclohexane，methyl-）（3.64％）、（+）-长叶烯（（+）-Longifolen）（22.17％）、丁香烯（Caryophyllene）（2.25％）、n-十六酸（n-Hexadecanoic acid）（3.35％）、油酸（9-Octadecenoic acid）（8.11％）、油酸乙酯（9-Octadecenoic acid，ethvl ester）（4.49％）、樟脑（Camphor）（3.32％）等，占挥发油总量的53.59％。并通过单因素实验，研究了其最佳工艺参数，最佳工艺参数为：浸提时间为10小时，料液比为10∶1，萃取溶剂为环己烷。通过结合单因素实验与正交实验设计法，确定马尾松树皮中萜类的最佳提取工艺条件为：浸泡时间为10天、料液比为1∶10、萃取溶剂为环己烷。得到的产物经GC／MS检测，结合NIST107谱库及人工校对，得知其中含量最高的是两种萜类化合物，分别为α-萜品醇和长叶烯，其相对含量分别达到21.19％、25.48％，并且还有其它的萜类化合物，如匙叶桉油烯醇、长叶龙脑、香松烷醇、杜松脑，其中萜类的总相对含量达到了63.75％。通过体外抑菌实验研究，确定马尾松树皮挥发油具有广谱的抗菌作用，对绿脓杆菌、枯草杆菌、金色葡萄球菌、大肠杆菌都有抑制效果，特别是针对枯草杆菌有显著的抑制效果。提取得到的萜类化合物同样对绿脓杆菌、枯草杆菌、金色葡萄球菌、大肠杆菌有一定的抑制作用。上述二种供试液对真菌都没有抗菌作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 马尾松概述
• 1.2 松针的研究进展
• 1.2.1 化学成分的研究
• 1.2.2 药理作用
• 1.3 挥发油概述
• 1.3.1 挥发油的组成
• 1.3.2 挥发油的通性
• 1.3.3 挥发油的评价
• 1.3.4 挥发油的提取
• 1.4 松树皮的研究进展
• 1.4.1 松树皮提取物的物化性质
• 1.4.2 松树皮提取物的生理功效
• 1.4.3 松树皮提取物的安全毒理学分析
• 1.5 萜类
• 1.5.1 萜类的涵义和分类
• 1.5.2 萜类的提取方法
• 1.5.3 萜类的分离
• 1.6 微生物转化作用
• 1.6.1 有消毒与灭菌
• 1.6.2 培养基及其制备
• 1.7 GC-MS分析法
• 1.7.1 气相色谱基本原理
• 1.7.2 质谱的基本原理
• 1.7.3 气相色谱—质谱联用的优点
• 1.8 本课题研究的内容和意义
• 1.8.1 本课题研究的内容
• 1.8.2 意义
• 第二章 马尾松树皮中挥发油的提取分析研究及工艺参数优化
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 主要实验仪器
• 2.1.2 原料与化学试剂
• 2.2 实验过程及工艺流程
• 2.3 提取工艺参数优化
• 2.3.1 不同浸提时间对产率的影响
• 2.3.2 不同料液比对产率的影响
• 2.3.3 不同极性的萃取溶剂对产率的影响
• 2.4 分析条件与方法
• 2.4.1 分析条件
• 2.4.2 分析方法
• 2.5 实验结果与讨论
• 2.5.1 成分分析
• 2.5.2 工艺参数优化结果
• 2.5.3 讨论
• 第三章 马尾松树皮中萜类的提取纯化工艺参数优化研究
• 3.1 实验材料
• 3.1.1 主要实验仪器
• 3.1.2 原料与化学试剂
• 3.2 实验过程及工艺流程
• 3.2.1 实验材料的预处理
• 3.2.2 粉碎
• 3.2.3 浸提及减压浓缩过程
• 3.2.4 萃取及碱处理
• 3.2.5 结果分析
• 3.3 影响因素
• 3.3.1 单因素实验
• 3.3.2 正交设计及结果如下
• 3.4 GC-MS分析结果与讨论
• 3.5 实验过程中问题讨论
• 3.6 小结
• 第四章 马尾松树皮挥发油及马尾松树皮提取物中萜类化合物的抑菌实验
• 4.1 实验条件
• 4.1.1 实验主要仪器
• 4.1.2 主要实验材料
• 4.1.3 供试培养基
• 4.1.4 供试菌种
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 菌种活化
• 4.2.2 菌悬液的的制备
• 4.2.3 供试液的制备
• 4.2.4 滤纸片法测定抑菌效果
• 4.2.5 最低抑菌浓度（MIC）的测定
• 4.3 实验结果与讨论
• 4.3.1 供试液对五种供试菌的抑菌效果
• 4.3.2 供试液对五种供试菌的最低抑菌浓度（MIC）
• 4.3.3 实验小结
• 第五章 结论
• 参考文献
• 致谢