HPV感染、hTERC基因和EGFR表达与食管癌患者预后关系的研究

论文摘要

目的：检测食管癌组织、不典型增生组织及正常组织中HPV感染、hTERC基因和EGFR表达情况，分析三者之间的相关性，探讨三者与食管癌患者预后的关系。方法：选取2007年12月至2008年12月期间于河南科技大学第一附属医院手术的食管癌冻存标本92例。对食管癌大体标本依次选取癌组织、癌旁组织（距病灶边缘2cm）及正常组织制成蜡块，经病理学证实选取到食管癌组织92例、食管Ⅰ度不典型增生组织26例、食管Ⅱ/Ⅲ度不典型增生组织17例、食管正常组织89例。收集同期河南科技大学第一附属医院就诊行胃镜检查人群的食管不典型增生组织10例，食管正常粘膜40例。对大体标本癌组织92例及胃镜所取食管不典型增生组织10例，食管正常粘膜40例制成细胞悬液，经DNA提取、PCR扩增、等离子谐振技术检测食管癌HPV感染情况。食管癌组织92例、食管Ⅰ度不典型增生组织26例、食管Ⅱ/Ⅲ度不典型增生组织17例、食管正常组织89例采用荧光原位杂交（FISH）技术检测hTERC基因表达情况，采用免疫组织化学法检测EGFR表达情况。结果：40例食管正常粘膜、10例不典型增生组织、92例癌组织共检测到20例标本HPV阳性，其感染型别有高危型18、35、51、56、66、58、68、39、81、59、16及低危型42、54；5例标本存在混合感染，其中4例包含HPV18型。主要感染型别为HPV18、HPV35、HPV51，7例标本存在HPV18感染，6例标本存在HPV35感染，5例标本存在HPV51感染。正常组织、非典型增生组织及食管癌组织HPV感染率分别为0%（0/40）、10.00%（1/10）及20.65%（19/92），差异具有统计学意义（χ2＝9.975，P=0.007）。食管癌中HPV感染与性别、年龄、抽烟、饮酒及家族史等因素没有明显相关性。89例正常组织、26例Ⅰ度不典型增生组织、17例Ⅱ/Ⅲ度不典型增生组织、92例食管癌组织的hTERC基因阳性表达率分别为0%（0/89），15.38%（4/26），47.06%（8/17），89.13%（82/92），差异具有统计学意义（χ2＝156.115，P=0.000）。在不典型增生组和食管癌组基因拷贝数明显增加，Ⅰ度不典型增生组平均拷贝数为2.17，Ⅱ/Ⅲ不典型增生的平均拷贝数为2.34，食管癌组平均拷贝数为2.62。食管癌组织中hTERC基因表达在组织分化程度、浸润深度、大体类型、淋巴结转移均无明显差异（P＞0.05）。89例正常组织、26例Ⅰ度不典型增生组织、17例Ⅱ/Ⅲ度不典型增生组织、92例食管癌组织的EGFR过表达率分别为0%（0/89），19.23%（5/26），58.82%（10/17），69.57%（64/92），差异具有统计学意义（χ2＝102.954，P=0.000）。食管癌组织中侵及全层的EGFR过表达率为78.00%（39/50），未侵及全层的EGFR过表达率为59.52%（25/42），差异具有统计学意义（χ2＝16.044，P=0.000）。食管癌组织中有淋巴结转移的EGFR过表达率为87.88%（29/33），无淋巴结转移的EGFR过表达率为59.32%（35/59），差异具有统计学意义（χ2＝8.151，P=0.004）。对92位患者术后随访3749月，截止2012年1月死亡47例，生存45例，3年生存率为51.94%。Kaplan-Meier生存分析法显示HPV阳性与HPV阴性组食管癌患者3年生存率分别为57.02%、50.70%，并用Logrank法对生存曲线进行假设检验显示两组生存曲线比较差异不具有统计学意义（P=0.7123）。Kaplan-Meier生存分析法显示hTERC基因阳性与hTERC基因阴性组食管癌患者3年生存率分别为47.29%、80.00%，并用Logrank法对生存曲线进行假设检验显示两组生存曲线比较差异具有统计学意义（P=0.0465）。Kaplan-Meier生存分析法显示EGFR阳性与EGFR阴性组食管癌患者3年生存率分别为42.42%、67.06%，并用Logrank法对生存曲线进行假设检验显示两组生存曲线比较差异具有统计学意义（P=0.0075）。配对卡方检验HPV感染与hTERC基因表达之间无相关性（χ2＝2.563，P=0.109），HPV感染与EGFR表达之间无相关性（χ2＝0.015，P=0.903），hTERC基因与EGFR表达之间无相关性（χ2＝0.485，P=0.486）。结论：1.HPV感染可能是食管癌发生的多因素之一，与预后无关。2.hTERC基因扩增参与食管癌的发生，与食管癌患者术后生存有一定关系，有望成为食管癌预后评价指标。3.EGFR过表达与食管癌发生、发展、预后密切相关，有望成为食管癌预后评价指标和分子靶向治疗的靶点。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 综述
• 1.1 人乳头瘤病毒与食管癌
• 1.1.1 食管癌流行病学
• 1.1.2 人乳头瘤病毒
• 1.1.3 人乳头瘤病毒致癌机制
• 1.1.4 人乳头瘤病毒相关疾病
• 1.1.5 人乳头瘤病毒与食管癌研究现状
• 1.2 端粒---端粒酶假说
• 1.3 表皮生长因子受体
• 第2章 前言
• 第3章 材料与方法
• 3.1 HPV 检测
• 3.1.1 食管癌组织标本
• 3.1.2 主要实验仪器
• 3.1.3 主要实验试剂
• 3.1.4 结果评价标准
• 3.1.5 实验步骤
• 3.1.6 统计学方法
• 3.2 hTERC 基因检测
• 3.2.1 食管癌组织标本
• 3.2.2 主要实验仪器
• 3.2.3 主要实验试剂
• 3.2.4 结果评价标准
• 3.2.5 实验步骤
• 3.2.6 统计学方法
• 3.3 EGFR 检测
• 3.3.1 食管癌组织标本
• 3.3.2 主要实验仪器
• 3.3.3 主要实验试剂
• 3.3.4 结果评价标准
• 3.3.5 实验步骤
• 3.3.6 统计学方法
• 第4章 结果
• 4.1 HPV 检测结果
• 4.1.1 食管癌中 HPV 感染的型别情况
• 4.1.2 不同组间 HPV 感染的情况
• 4.1.3 HPV 与临床病理资料之间的关系
• 4.1.4 HPV 感染与预后
• 4.2 hTERC 基因检测结果
• 4.2.1 hTERC 基因检测阈值建立
• 4.2.2 不同组间 hTERC 基因扩增情况
• 4.2.3 不同组间 hTERC 基因拷贝数特点及比较
• 4.2.4 hTERC 基因与临床病理资料之间的关系
• 4.2.5 hTERC 基因扩增与预后
• 4.3 EGFR 检测结果
• 4.3.1 不同组间 EGFR 过表达情况
• 4.3.2 EGFR 过表达与临床病理资料之间的关系
• 4.3.3 EGFR 过表达与预后
• 4.4 HPV 感染、hTERC 基因及 EGFR 表达之间的相关性
• 4.4.1 HPV 感染与 hTERC 基因的相关性
• 4.4.2 HPV 感染与 EGFR 过表达的相关性
• 4.4.3 hTERC 基因与 EGFR 过表达的相关性
• 第5章 讨论
• 5.1 食管癌与 HPV
• 5.2 食管癌与 hTERC 基因
• 5.3 食管癌与 EGFR
• 5.4 HPV 感染、hTERC 基因及 EGFR 表达之间的相关性
• 第6章 结论
• 参考文献
• 缩略语词汇
• 附录 A
• 致谢
• 攻读硕士学位期间的研究成果