论文摘要
本课题筛选米根霉高效生产乳酸菌株,研究了发酵调控方法,以更高的光学纯度、更大的产物量和更低的成本生产乳酸。研究工作分两个方面:1)微量元素在L-乳酸发酵中起着重要作用。本研究选择Mg2+、K+、Zn2+作为调控重点,根据发酵过程各影响因素的变化,在线调控微量元素的浓度,分析其对米根霉发酵生产L-乳酸的影响。结果表明,Mg2+与L-乳酸积累呈正相关性;发酵进行12 h对Mg2+正调控;低浓度的K+、Zn2+与L-乳酸积累呈负相关性。发酵开始12 h对Zn2+负调控,36 h对K+进行负调控。各元素综合调控后L-乳酸最高产量较未调控时提高了28.15%,L-乳酸的光学纯度达到100%。2)本实验中,研究和控制初始发酵条件,比较产物L-乳酸、D-乳酸组成变化,得出提高L-乳酸光学纯度的米根霉发酵生产条件:在pH 6.0、温度34°C、初始葡萄糖浓度100g/L,NH4NO3 2g/L的适合条件下,米根霉HZS6能够发酵生产光学纯度99%以上的L-乳酸,其转化率达到80%,终浓度为81.3 g/L。通过在发酵前期添加L-乳酸进行发酵调控实验,进一步研究对乳酸纯度的影响,从而以最低成本来提高所产L-乳酸的光学纯度。考察了发酵初期通过添加L-乳酸对米根霉菌产物光学纯度的影响。发酵初期在米根霉菌发酵培养基中添加L-乳酸可以调控发酵产物乳酸的光学纯度。随着L-乳酸添加量的增加,所产L-乳酸的光学纯度随之增加,当L-乳酸的添加量≥1.5 g/L时,D-乳酸不再产生。同时,L-乳酸的产量、生物量、糖转化率也随之降低。
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