论文摘要
目的 将培养的人神经干细胞（neural stem cells,NSC）移植至新生鼠缺血缺氧性脑损伤（hypoxic-ischemic brain injure,HIBI）的海马区,观察植入细胞的迁移及分化。探索缺血缺氧性脑病（hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE）的治疗方法。 材料与方法 1.细胞培养:取孕12周人胚胎脑组织,制备成单细胞悬液,接种于N2培养基中（D/F12+N2+B27）,细胞接种浓度为3～5×105/ml,培养基中添加表皮生长因子（epidermal growth factor EGF）20ng/ml、碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor bFGF）10ng/ml、白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor LIF）10ng/ml,培养十天后,添加10%胎牛血清（fetal bovine serum FBS）诱导分化4-5天,形成含5-30个细胞的小神经细胞球。细胞球经低速离心浓缩,在N2培养基中调整细胞终浓度为5.0×104cells/ul,待移植时用。 2.神经干细胞移植:SD新生大鼠（n=32）生后第7天进行HIBD模型制作,模型制作后3天予人NSC移植。准备移植的幼鼠麻醉后固定在立体定向仪上,人NSC注入左侧（损伤侧）海马区,注射位点如下:AP=-3mm,ML=-2.5mm,DV=-2mm。通过微量注射器注射2ul（细胞浓度为5.0×104cells/ul）。移植后动物不予免疫抑制剂。移植后1周、2周、4周及3月的鼠过量麻醉后,4%的多聚甲醛
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