大鼠局灶性脑缺血后脑内不同区域β-淀粉样蛋白沉积动态变化的研究

论文摘要

前言随着世界人口的老龄化，脑血管病已成为致死、致残率最高的疾病之一。脑缺血通过多种病理生化机制引起脑组织损伤，不同部位脑组织对缺血损伤的耐受力不同。β-淀粉样蛋白（β-amyloid protein，Aβ）来源于一种称为淀粉样前体蛋白（amyloid precursor protein，APP）的跨膜糖蛋白，具有神经毒性还可增强或放大各种伤害性刺激，如低血糖、兴奋性毒素及自由基等的细胞损伤效应。Aβ在正常脑组织及脑脊液中有微量表达，脑缺血后Aβ的表达上调，但其在脑缺血损伤过程中的作用机制尚未完全明确。本实验采用大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型，检测脑缺血后大鼠脑内皮层、海马及丘脑Aβ表达随时间变化的情况，以探讨脑缺血后，Aβ在脑内不同部位表达变化情况，以及其在脑缺血损伤中的作用。材料与方法1、实验动物及分组选用270～300g Wistar大鼠30只，均购自中国医科大学实验动物部，雌雄不限，分为：正常对照组（n=6）、假手术组（n=6）及实验组（n=18）；实验组又分为1W、2W和4W三个亚组，每组6只大鼠。实验组采用改良线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）再灌注模型，假手术组仅分离暴露左侧颈总、颈外及颈内动脉，而不做大脑中动脉闭塞。2、免疫组化法检测Aβ蛋白表达实验组于术后1W、2W及4W分别处死6只大鼠，正常对照组及假手术组大鼠在饲养1W后处死。经心内灌注固定后断头取脑，石蜡包埋，免疫组化法检测Aβ蛋白表达情况。3、图像分析每个标本取皮层、海马及丘脑三张切片，分别在高倍镜（400×）下随机观察不重叠的8个视野，显微图像分析系统采集图像，细胞浆中呈棕黄色颗粒者为阳性细胞，分析阳性细胞光密度值。4、统计处理各组数据用（?）±s表示，采用SPSS 13.0统计软件进行单因素方差分析ANOVA，P＜0.05为差异具有统计学意义。实验结果1、神经元形态变化正常对照组和假手术组各脑区神经元形态正常，缺血后1W及2W时各脑区神经元明显肿胀膨大，胞浆清亮，细胞核固缩浓染，4W时各脑区神经元形态基本恢复。2、三脑区Aβ沉积量随时间的变化假手术组三脑区Aβ沉积量与正常对照组间无显著差异（P＞0.05）；各实验组三脑区Aβ沉积量均显著高于正常对照组及假手术组（P＜0.05），且随时间逐渐减少（P＜0.05）。3、各时间点三脑区间Aβ沉积量比较1W、4W时三脑区Aβ沉积量不同（P＜0.05），皮层Aβ沉积量明显高于海马（P＜0.05）；2W时三脑区Aβ沉积量无明显差异（P＞0.05）。结论脑缺血后脑内皮质、丘脑及海马均有Aβ沉积，Aβ沉积量随时间逐渐减少。脑缺血后各时间点脑内皮层Aβ沉积量最高，海马Aβ沉积量较少。

论文目录

• 一、摘要
• 中文论著摘要
• 英文论著摘要
• 二、英文缩略语
• 三、论文
• 前言
• 材料与方法
• 实验结果
• 讨论
• 结论
• 四、本研究创新性的自我评价
• 五、参考文献
• 六、附录
• 综述
• 在学期间科研成绩
• 致谢
• 个人简介