不同片段银耳多糖的制备、化学结构和对肿瘤药物化疗减毒作用的研究

论文摘要

目的:制备不同分子量片段的银耳多糖,对其进行理化性质、化学结构的研究,并筛选出对抗肿瘤药物具有减毒、升高白细胞作用的最佳活性多糖。方法:正交试验法考察银耳多糖的提取条件,确定提取工艺;酸水解方法制备不同分子量片段的银耳多糖,通过苯酚-硫酸法、间羟基联苯法、Lowry法及BCA法对其进行理化性质的研究,HPLC法确定其糖组成,并采用甲基化、GC-MS研究其糖苷键的连接方式。对正常小鼠及白细胞减少模型组的小鼠采用静脉注射给药,观察不同分子量、不同侧链样品对抗肿瘤药物的减毒升白作用。结果:正交试验法得到银耳多糖的最佳提取工艺为50倍量的水进行煎煮,每次三小时共煎煮三次;通过酸水解法得到20万道尔顿（D）、3万D和4千D三个不同分子量片段的银耳多糖;其理化性质测定结果为:20万D分子量片段中性糖含量约为76.5%,酸性糖含量约为19.8%,蛋白含量约为9%;3万D分子量片段中性糖含量约为78.2%,酸性糖含量约为22.1%,蛋白含量约为6.2%;4千D分子量片段中性糖含量约为83.1%,酸性糖含量约为22.3%,蛋白含量约为8.2%。HPLC法分析结果表明,三个不同分子量片段的银耳多糖均由Man、Xyl和GlcA组成。GC-MS结果表明不同分子量片段的银耳多糖均以1→3连接的Man为主链,并含有少量的1→4连接的Xyl,其非还原末端主要由葡萄糖醛酸构成;通过对不同分子量片段的银耳多糖构效关系及其药理作用的的研究可知分子量为3万D、4千D的银耳多糖片段对抗肿瘤药物致外周血白细胞减少具有较好的升高白细胞的作用。结论:本实验通过对银耳多糖的提取、水解、理化性质、构效关系的研究并结合药理实验,筛选出具有对抗肿瘤药物减毒升白作用的银耳多糖片段,不仅对银耳多糖构效关系的总结及作用机理有明显的推动作用,也对药物开发具有重要意义。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 英文缩略语
• 前言
• 文献综述
• 1 多糖来源
• 2 多糖的提取、分离纯化、纯度鉴定及分子量测定
• 3 多糖的构效关系研究
• 4 多糖的生物活性及在医药领域中的应用
• 5 银耳多糖研究进展
• 实验研究
• 第一章 银耳多糖的提取、不同分子量片段的制备
• 第一节 银耳多糖的提取
• 实验方法
• 结果
• 讨论
• 第二节 不同分子量及不同侧链银耳多糖制备
• 实验部分
• 1 碱水解条件的考察
• 2 酸水解条件的考察
• 结果与讨论
• 第三节 大量制备不同分子量片段银耳多糖
• 第二章 银耳多糖理化性质的测定
• 第一节 不同分子量样品理化性质的测定
• 材料与方法
• 1 药品与仪器
• 2 理化性质的研究
• 结果与讨论
• 1 分子量测定结果与讨论
• 2 总糖含量测定结果与讨论
• 3 糖醛酸含量测定结果与讨论
• 4 蛋白质含量测定结果与讨论
• 第二节 银耳多糖的组成糖分析
• 材料与方法
• 1 试剂与仪器
• 2 方法
• 结果与讨论
• 第三节 不同分子量片段银耳多糖活性炭法除蛋白
• 实验方法
• 1 过活性炭柱
• 2 过活性炭柱后理化性质的测定
• 讨论
• 第三章 银耳多糖的结构研究
• 材料与方法
• 1 试剂与仪器
• 2 甲基化分析
• 结果与讨论
• 第四章 银耳多糖不同分子量对环磷酰胺致外周血白细胞减少的对抗作用的关系研究
• 实验材料与方法
• 1 实验材料
• 2 实验方法
• 结果与讨论
• 1 实验结果
• 2 讨论
• 结果与讨论
• 结语
• 致谢
• 参考文献
• 附图